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无细胞蛋白表达 氨基酸混标 (20 AA)|"CELL FREE" AMINO ACID MIX (20 AA) UNLABELED介绍:

产品类型:标准物质(RM)-纯品型
产品品牌:CIL

您正在浏览的产品:无细胞蛋白表达 氨基酸混标 (20 AA)|"CELL FREE" AMINO ACID MIX (20 AA) UNLABELED

手机版:无细胞蛋白表达 氨基酸混标 (20 AA)|"CELL FREE" AMINO ACID MIX (20 AA) UNLABELED

本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。

标准名称及标准号
GB 5009.124-2016 食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定
适用范围
本标准适用于食品中20种氨基酸(包括天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸等)的定量检测,涵盖乳制品、谷物、婴幼儿食品等基质。适用于无细胞蛋白表达系统中氨基酸代谢产物的分析。
核心检测方法
柱前衍生-高效液相色谱法
1. 样品经盐酸水解后,用邻苯二甲醛(OPA)和9-芴基甲基氯甲酸酯(FMOC)进行衍生化
2. 采用C18反相色谱柱分离
3. 荧光检测器定量(激发波长340nm,发射波长450nm)
4. 外标法定量计算氨基酸浓度
检出限与定量限
氨基酸类型 检出限(LOD, mg/kg) 定量限(LOQ, mg/kg)
碱性氨基酸(赖氨酸等) 0.5-1.0 2.0-3.0
中性氨基酸(丙氨酸等) 0.3-0.8 1.0-2.5
酸性氨基酸(天冬氨酸等) 0.2-0.6 0.8-2.0
质控样品要求
1. 每批样品需同时测定空白对照和加标回收样品
2. 使用有证氨基酸标准物质(如GBW(E)100066)校准系统
3. 平行样数量≥总样品量的10%
4. 回收率控制范围:85%-110%
5. 保留时间偏差<±1%
关键实验步骤
样品前处理
1. 称取0.1g样品加入6mol/L盐酸,110℃水解24h
2. 水解液经0.22μm滤膜过滤

衍生化反应
1. 取10μL滤液与20μL OPA试剂混合(反应1min)
2. 加入10μL FMOC试剂(反应3min)

色谱条件
1. 柱温:40℃
2. 流速:1.0mL/min
3. 流动相A:10mmol/L磷酸二氢钠(pH7.8)
4. 流动相B:乙腈:甲醇:水=45:45:10
5. 梯度洗脱程序:0min→5%B;30min→55%B
特别说明
1. 色氨酸需采用碱水解单独测定
2. 含硫氨基酸(胱氨酸、蛋氨酸)需进行过甲酸氧化预处理
3. 无细胞表达体系样品需去除核苷酸干扰(建议使用10kDa超滤离心)
4. 衍生试剂需现配现用(OPA有效期≤24h)
5. 当检测脯氨酸和羟脯氨酸时需增加柱后衍生模块

以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!