MC培养基/用于食品中嗜热链球菌总数测定
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用途:用于食品中嗜热链球菌总数测定。
成分(g/L):
检验原理:
大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解,以辨别乳酸菌;琼脂是培养基的凝固剂;中性红为pH 指示剂。
用法:
称取本品80.0g,加热煮沸溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
注:培养基中有较多不溶性的碳酸钙,灭菌后有大量白色沉淀,需摇匀使用。
MC培养基微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养48±2小时。
嗜酸乳杆菌在生长发酵过程中可产生大量乳酸,故可与碳酸钙发生反应生成明显溶钙环;
嗜热链球菌在发酵过程中产生L-乳酸和叶酸,与碳酸钙发生反应生成较微弱溶钙环。
MC培养基
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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。
适用于含活性乳酸菌的食品中乳酸菌检验,包括乳酸菌饮料、发酵乳制品等含活菌的食品类别[5]。
采用改良MC培养基进行菌落计数,通过样品梯度稀释、倾注平板法接种(替代旧版涂布法),培养后观察溶钙环特征以鉴别乳酸菌[1][10]。
1. 样品预处理:无菌操作下按1:10梯度稀释至适宜浓度;
2. 接种:取1mL稀释液倾注于MC培养基平板;
3. 培养:36±1℃厌氧/微需氧环境培养72±2小时;
4. 计数:选取30-300CFU的平板,统计具有溶钙环特征的红色菌落[1][10]。
未明确具体数值,但要求最终平板菌落数需在30-300CFU范围内,稀释梯度设计需满足此计数要求[5]。
需同步进行空白对照及阳性对照实验,阳性对照菌株应呈现典型溶钙环及红色菌落特征[5]。
1. 新版标准将培养时间延长至72小时以提高检测灵敏度;
2. 对疑似污染样品,可在培养基中添加硫酸多粘菌素B(10,000IU/100mL)抑制杂菌;
3. 倾注法需控制培养基温度≤46℃以防止烫伤目标菌[1][10]。
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