MRS培养基/用于食品中乳酸菌的分离培养或计数
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用途:用于食品中乳酸菌的分离培养或计数。
成分(g/L):
检验原理:
蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80 和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌并中和细胞毒性物质,为乳酸菌提供一个良好的生长环境;琼脂是培养基的凝固剂。
用法:
称取本品 66.2g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15-20 分钟,备用。
注:培养基中有少量的硫酸镁和硫酸锰,灭菌后可能出现微量沉淀。
乳酸菌保存方法
方法1:菌株可保存于甘油肉汤保存管内,取纯化后的菌落接种于MRS平板培养基内,于35±1℃厌氧培养48-72h,用无菌棉签刮取适量菌落于甘油肉汤管内混匀,于-80℃冰箱保存。
方法2:长期保存可将菌株冷冻干燥后冷藏保存,取纯化后的菌落接种于MRS平板培养基内,于35±1℃厌氧培养48-72h后,向每个平板中加入1mL脱脂奶粉配成的冻存液,用L涂布棒刮取平板上菌落于冻存液内,继而吸取200uL放入冻干瓶内,冻干后于2-4℃冰箱保存。
MRS上德氏乳杆菌和嗜热链球菌的菌落形态:
MRS培养基微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养48±2小时。
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2. 厌氧培养:采用厌氧罐/袋维持无氧环境;
3. 培养基融化:沸水浴或蒸汽加热,避免反复融化;
4. PCR检测:需控制DNA提取效率和扩增循环数[4][6][7]。
2. 改良配方添加莫匹罗星锂盐抑制杂菌;
3. 明确乳酸菌生化特性:触酶阴性、无芽孢、革兰氏阳性;
4. 新增实时荧光PCR法需配套CNAS认证试剂[4][6][7]。
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