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T7

YSBC11417b-99(491)

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150g/瓶

钢研纳克

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T7介绍：

产品组成：

编号	C	Si	Mn	P	S	Ni	Cu
YSBC11417b-99(491)	0.73	0.34	0.18	0.013	0.0028	0.013	0.024

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手机版：T7

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

常见病毒核酸检测方法解读

标准名称及标准号

GB/T 35916-2018《常见病毒核酸检测方法第1部分：轮状病毒、诺如病毒和星状病毒》

适用范围

适用于食品、环境样品及临床标本中轮状病毒、诺如病毒和星状病毒的核酸检测。涵盖样本前处理、核酸提取、RT-PCR检测全流程，特别适用于使用T7 RNA聚合酶制备RNA标准品的实验体系。

核心检测方法

1. 逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)
2. T7体外转录系统制备RNA标准品：使用含T7启动子的质粒模板，经T7 RNA聚合酶催化合成病毒RNA标准品
3. 双重PCR检测体系：可同时检测多种病毒靶标

检出限与定量限

检出限(LOD)：10拷贝/反应体系
定量限(LOQ)：50拷贝/反应体系
*基于T7转录制备的RNA标准曲线验证，R²≥0.99

质控样品要求

1. 阳性对照：T7转录制备的靶标RNA（梯度稀释）
2. 阴性对照：无核酸酶水替代模板
3. 内标对照：MS2噬菌体或T7转录制备的内参RNA
4. 过程对照：已知浓度加标样品，全程监控回收率

关键实验步骤

RNA标准品制备：
1. T7启动子质粒线性化处理
2. T7 RNA聚合酶体外转录（37℃/2h）
3. DNase I消化DNA模板
4. 纯化定量，分装保存于-80℃

检测流程：
1. 样本病毒富集（PEG沉淀）
2. 核酸提取（胍盐法/磁珠法）
3. 一步法RT-qPCR（含UNG防污染体系）
4. 扩增曲线分析（Ct值判定）

特别说明

1. T7 RNA聚合酶活性要求：≥50 U/μL，批内变异系数＜5%
2. 体外转录RNA完整性：需经Agilent 2100验证RIN值≥7.0
3. 防RNase污染：实验环境需经DEPC水处理
4. 扩增抑制监控：样本需进行10倍稀释验证抑制效应

以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！