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无细胞蛋白表达 氨基酸混标-13C;15N;D同位素|CELL FREE AMINO ACID MIX (20 AA)介绍:

产品类型:标准物质(RM)-纯品型
产品品牌:CIL

您正在浏览的产品:无细胞蛋白表达 氨基酸混标-13C;15N;D同位素|CELL FREE AMINO ACID MIX (20 AA)

手机版:无细胞蛋白表达 氨基酸混标-13C;15N;D同位素|CELL FREE AMINO ACID MIX (20 AA)

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相关国家标准解读
标准名称及标准号 GB 5009.124-2016《食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定》
适用范围 适用于食品及生物样品中20种氨基酸的定量分析,包括同位素标记氨基酸的检测。标准涵盖酶解蛋白样品的前处理方法,与无细胞蛋白表达体系中氨基酸分析高度相关。
核心检测方法 1. 同位素稀释液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)
2. 采用稳定同位素标记氨基酸作为内标物(如13C,15N标记物)
3. 通过质谱多反应监测(MRM)模式进行目标物定量
检出限与定量限
指标 要求
方法检出限(MDL) 0.02-0.5 mg/kg(不同氨基酸有差异)
定量限(LOQ) 0.05-1.5 mg/kg(实际应用中需根据同位素丰度校准)
质控样品要求 1. 每批次需带同位素内标校正曲线(至少5个浓度点)
2. 加标回收率范围:80%-120%
3. 平行样相对偏差:≤15%
4. 每20样品插入1个质控盲样
关键实验步骤
步骤 操作要点
样品前处理 加入同位素混标→盐酸水解(110℃/24h)→离心过滤→氮吹复溶
色谱条件 HILIC色谱柱,流动相:乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱
质谱参数 ESI+模式,毛细管电压3.5kV,离子源温度150℃
定量分析 以内标物峰面积为基准,采用内标标准曲线法
特别说明 1. 同位素混标需避光-80℃保存,避免反复冻融
2. 含硫氨基酸(胱氨酸、蛋氨酸)需进行过甲酸氧化预处理
3. 需验证同位素标记物的交叉干扰(如D标记物在质谱中的H/D交换效应)
4. 方法适用于无细胞表达体系,但需注意基质效应差异

以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!