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台盼蓝染色原理模拟活/死细胞浓度和比例标准物质

NIM-RM4001

Reference Materials for Mimetic Live/Dead Cell Concentration and Livability Ratio Series of Trypan Blue

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台盼蓝染色原理模拟活/死细胞浓度和比例标准物质介绍：

台盼蓝染色原理模拟活/死细胞浓度和比例标准物质

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涉及的国家标准与行业标准解读

YY/T 0606.15-2014《组织工程医疗产品第15部分：评价基质及支架免疫反应的实验方法细胞迁移试验》

适用范围	适用于组织工程产品中细胞存活率的检测，明确台盼蓝染色法用于区分活/死细胞
关联内容	• 规定台盼蓝染色浓度范围为0.1%-0.5%（推荐0.4%），染色时间≤5分钟 • 活细胞率计算公式：活细胞数/(活细胞数+死细胞数)×100%，要求活细胞率≥90%为合格
检出限	显微镜计数法最低可检测细胞浓度为1×10⁴ cells/mL，活细胞比例误差≤5%

《中华人民共和国药典》（2020年版）四部通则<生物检查法>（通则1101）

适用范围	药品生产与质量控制中细胞活性检测，明确台盼蓝排斥试验为法定方法
关联内容	• 要求染色后10分钟内完成计数，避免假阳性 • 规定细胞悬液浓度宜控制在1×10⁵-1×10⁶ cells/mL • 明确血球计数板双室重复计数的差异应＜15%
检出限	最低有效统计量为200个细胞，活率检测范围10%-99%

GB/T 39769-2021《细胞计数通用要求流式细胞测定法》

适用范围	流式细胞术与台盼蓝联用检测活细胞比例
关联内容	• 规定流式检测时台盼蓝终浓度≤0.2%，避免荧光干扰 • 要求设置7-AAD/PI等荧光染料作为方法学对照 • 明确数据分析时需排除细胞碎片（FSC/SSC设门）
检出限	流式法最低检测限为1×10³ cells/mL，活细胞分辨率达0.1%

台盼蓝染色核心原理说明

基于细胞膜选择性通透：

活细胞膜完整，台盼蓝（分子量960.8 Da）无法穿透，保持无色透明

死细胞膜破损，染料进入并与胞内蛋白结合显蓝色

注意：凋亡早期细胞可能出现部分染色，需结合Annexin V/PI双染法验证

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