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ctDNA基因突变(KRAS

NIM-RM5245

Reference Material of circulating tumor DNA containing KRAS G12A/G12D/G12C/G12V/PIK3CA E545K/EGFR L858R/T790M/19DEL/BRAF V600E gene mutation

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ctDNA基因突变(KRAS介绍：

ctDNA基因突变(KRAS

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涉及标准及解读

1. T/CPMA 022-2020《循环肿瘤DNA测定与临床应用技术指南》	适用范围：适用于临床实验室对ctDNA检测的技术操作规范，涵盖实体肿瘤相关基因突变（包括KRAS、EGFR等）的检测流程。	关联内容：规定了样本采集（推荐使用10 mL外周血）、DNA提取、检测方法选择（如ddPCR、NGS）、结果解读及质控要求。明确要求检测报告需包含突变位点、突变频率及临床意义分级。	检出限：不同检测方法的最低检测限要求：数字PCR技术≤0.1%，NGS技术≤1%（需验证）。KRAS常见突变位点（如G12D、G12V）需满足该灵敏度标准。
2. T/SZGIA 005-2018《基于外周血的循环肿瘤DNA基因突变检测技术规范》	适用范围：专门针对外周血ctDNA检测的技术要求，包含KRAS基因突变检测的操作流程规范。	关联内容：要求血浆分离需在采血后4小时内完成，DNA提取试剂盒需符合血液游离DNA提取要求。明确ddPCR和ARMS-PCR方法的验证流程，规定每批次检测需包含阳性质控品（含0.5%突变频率）和阴性质控。	检出限：规定ddPCR方法最低可检测到0.1%突变频率，NGS平台需达到0.5%的检测下限（LOD）。KRAS热点突变需提供不同突变频率的验证数据。
3. GB/T 30934-2014《肿瘤个体化治疗检测技术指南》	适用范围：覆盖肿瘤基因突变检测的通用技术要求，包括ctDNA中KRAS突变检测的技术路径。	关联内容：规定检测前需进行方法学验证（精密度、准确度、分析敏感性/特异性），要求实验室建立标准操作程序（SOP）。特别指出KRAS突变检测需覆盖第2外显子的12/13密码子热点区域。	检出限：未明确具体数值，但要求检测方法需能识别≥5%的突变频率，对低频突变检测需在报告中注明方法局限性。
4. GB/T 35518-2017《医学高通量测序数据处理》	适用范围：规范NGS技术检测ctDNA的数据分析流程，适用于KRAS突变的生物信息学分析。	关联内容：要求原始数据质量需满足Q30≥80%，比对率≥95%。突变识别需使用≥2种算法交叉验证，KRAS突变位点需与COSMIC数据库进行比对注释。	检出限：通过测序深度控制灵敏度，建议目标区域平均深度≥5000×，低频突变检测下限可达0.1%。

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