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天冬酰胺肉汤/用于铜绿假单胞菌的生长试验

HB9261

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250g

hopebio

见证书

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天冬酰胺肉汤介绍：

用途:用于铜绿假单胞菌的生长试验。

原理:

具有天冬酰胺酶的细菌能利用天冬酰胺作为碳源；磷酸盐促进荧光素的产生；硫酸镁提供生长必要的离子，镁离子可以促进绿脓色素和荧光素的产生。

成分(g/L)

天冬酰胺	3.0
磷酸氢二钾	1.0
七水合硫酸镁	0.5
pH值6.9-7.2	25℃

用法称取本品4.24g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。

注:配制双料天冬酰胺肉汤时,需称取本品8.48g加入1000ml蒸馏水中。

天冬酰胺肉汤培养基微生物质控结果

天冬酰胺肉汤微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置35℃需氧培养48小时。

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一、食品安全国家标准《食品中天冬酰胺和谷氨酰胺的测定》

适用范围	第一法（柱前衍生-HPLC）适用于特殊膳食用食品中游离态天冬酰胺、谷氨酰胺及总量测定；第二法（LC-MS/MS）适用于总量测定[1][3]
核心检测方法	第一法：丹磺酰氯柱前衍生，C18色谱柱分离，紫外检测器定量；第二法：液相色谱-串联质谱法[1][3]
检出限与定量限	具体检出限与定量限需依据标准文本中不同食品基质及检测方法确定[1]
质控样品要求	需包含空白样品、加标样品及平行样，酶解步骤需控制温度(37±1℃)和时间(16h±10min)[3]
关键实验步骤	1. 酶解处理需使用灰色链霉菌蛋白酶 2. 衍生反应需精确控制pH值(9.0±0.2) 3. 色谱分离梯度程序需严格校准[1][3]
特别说明	游离态测定需采用直接提取法，总量测定需酶解处理；LC-MS/MS法适用于复杂基质样品[1][3]

二、团体标准 T/SATA 079-2024

适用范围	果蔬中天冬酰胺和谷氨酰胺含量测定，采用高效液相色谱-串联质谱法[4]
核心检测方法	1. 乙腈-水溶液提取 2. 同位素内标法定量 3. 质谱检测采用多反应监测模式[4]
方法特性	定量限可达0.5mg/kg，相对标准偏差≤10%，回收率85%-110%[4]
样品处理要求	均质样品需过0.22μm滤膜，低温离心(4℃)防止酶解[4]
色谱条件	1. 流动相：甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱 2. 柱温：30℃ 3. 流速：0.3mL/min[4]
质谱参数	离子源温度500℃，雾化气压力50psi，碰撞能量优化范围15-35eV[4]

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