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硝酸盐还原试剂盒/用于硝酸盐还原试验

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5ml*4

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详见说明

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硝酸盐还原试剂盒介绍：

操作视频｜硝酸盐还原实验

试剂盒组成：

组成	别名	规格	配制依据
溶液A	对甲基苯磺酸溶液	5ml*2	在1000mL 5mol/L乙酸中溶解8g对氨基苯磺酸
溶液B	α-萘酚乙酸溶液	5ml*2	在1000mL 5mol/L乙酸中溶解5g α-萘酚

反应原理：

蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子；某些细菌可利用硝酸盐产亚硝酸盐、氨或氮气。滴加硝酸盐还原试剂后若试验菌培养物中有亚硝酸盐，可与乙酸、对苯氨基苯磺酸和α-萘酚反应生成红色的N-α-苯胺偶氮苯磺酸。若试验菌可利用硝酸盐产亚硝酸盐进一步转化为氮气，则小倒管中会有气体囤积，判定为阳性。若试验菌可将亚硝酸盐转化为氨，则滴加硝酸盐还原试剂呈无色反应，此时需加入适量锌粉证明培养物中是否有未被利用的硝酸盐存在，若加入锌粉后为无色则证明无硝酸盐，则可判断为阳性。试验菌不利用硝酸盐，滴加硝酸盐还原试剂后为无色，加入锌粉后变为红色，证明培养物中有未被利用的硝酸盐被锌粉还原为亚硝酸盐产生红色反应，此时判断为阴性。

操作步骤：

1．培养物接种于硝酸盐肉汤，36±1℃培养1-5天。

2．加入溶液A和溶液B各2-3滴，混匀。

3．立即观察结果，也可以放置室温2-5分钟观察结果。

结果判断：

阳性反应：红色。

阴性反应：不变色（无红色出现）

注：如出现阴性结果，可再加入锌粉少许，若出现红色，则鉴定为阴性结果，若不变色则为阳性结果。

硝酸盐还原试剂盒微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

相关资料：

硝酸盐还原试验的简单介绍点击查看

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

1. 适用范围

适用于食品、水质、乳制品、肉类等样品中硝酸盐的检测，尤其针对食品卫生安全、环境监测领域。检测对象包括蔬菜、水果、饮用水、加工肉制品等。

2. 核心检测方法

采用锌还原法（GB 5009.33-2016）或酶标法（HJ/T 198-2005）。锌还原法通过硝酸盐在酸性条件下被还原为亚硝酸盐，经显色反应定量；酶标法则利用硝酸盐还原酶催化反应，结合分光光度法测定吸光度值。

3. 检出限与定量限

锌还原法检出限为0.2 mg/kg（以NO3-计），定量限为0.5 mg/kg；酶标法检出限可达0.05 U/L，定量限为0.1 U/L。具体参数需根据样品基质调整。

4. 质控样品要求

每批次检测需包含空白对照、阳性对照（已知浓度硝酸盐标准品）及加标回收样品。加标回收率应控制在85%-115%，标准曲线相关系数R²≥0.995。

5. 关键实验步骤

① 样品前处理：均质后离心取上清液；
② 还原反应：加入锌粉或硝酸盐还原酶，37℃避光反应30分钟；
③ 显色测定：加入显色剂后立即检测520 nm吸光度值；
④ 结果计算：通过标准曲线换算硝酸盐浓度。

6. 特别说明

① 亚硝酸盐浓度过高会导致假阳性，需预先去除干扰；
② 锌还原法需严格控制pH值（1.5-2.0）；
③ 酶标法需确保试剂活性，避免反复冻融；
④ 含硫化物样品需进行氧化预处理。

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