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硝酸盐还原试剂盒/用于硝酸盐还原试验

HB8282

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5ml*4

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见证书

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硝酸盐还原试剂盒介绍：

试剂盒组成：

组成	别名	规格	配制依据
溶液A	对甲基苯磺酸溶液	5ml*2	在1000mL 5mol/L乙酸中溶解8g对氨基苯磺酸
溶液B	α-萘酚乙酸溶液	5ml*2	在1000mL 5mol/L乙酸中溶解5g α-萘酚

反应原理：

蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子；某些细菌可利用硝酸盐产亚硝酸盐、氨或氮气。滴加硝酸盐还原试剂后若试验菌培养物中有亚硝酸盐，可与乙酸、对苯氨基苯磺酸和α-萘酚反应生成红色的N-α-苯胺偶氮苯磺酸。若试验菌可利用硝酸盐产亚硝酸盐进一步转化为氮气，则小倒管中会有气体囤积，判定为阳性。若试验菌可将亚硝酸盐转化为氨，则滴加硝酸盐还原试剂呈无色反应，此时需加入适量锌粉证明培养物中是否有未被利用的硝酸盐存在，若加入锌粉后为无色则证明无硝酸盐，则可判断为阳性。试验菌不利用硝酸盐，滴加硝酸盐还原试剂后为无色，加入锌粉后变为红色，证明培养物中有未被利用的硝酸盐被锌粉还原为亚硝酸盐产生红色反应，此时判断为阴性。

保存条件：2-8℃

操作步骤：

1.培养物接种于硝酸盐肉汤，36±1℃培养1-5天。

2.加入溶液A和溶液B各2-3滴，混匀。

3.立即观察结果，也可以放置室温2-5分钟观察结果。

结果判断：

阳性反应：红色

阴性反应：不变色（无红色出现）

注：如出现阴性结果，可再加入锌粉少许，若出现红色，则鉴定为阴性结果，若不变色则为阳性结果。

硝酸盐还原试剂盒微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

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国家标准解读：硝酸盐还原试验相关标准

标准名称及标准号

GB/T 5750.5-2023《生活饮用水标准检验方法第5部分：无机非金属指标》

适用范围	适用于生活饮用水、水源水及水处理过程中硝酸盐的检测，涵盖水质监测、污染源排查等场景。

核心检测方法

镉柱还原分光光度法：通过镉金属将硝酸盐还原为亚硝酸盐，使用分光光度计在540 nm波长处测定吸光度，根据标准曲线定量。

检出限与定量限

检出限为0.005 mg/L（以NO₃^--N计），定量限为0.02 mg/L，满足痕量检测需求。

质控样品要求

需同步检测空白样、平行样及加标回收样，平行样相对偏差≤10%，加标回收率应控制在85%-115%。

关键实验步骤

1. 样品预处理（过滤、pH调节）；
2. 镉柱活化与流速控制；
3. 显色反应（磺胺-萘乙二胺法）；
4. 避光静置15分钟后比色。

特别说明	1. 镉柱还原效率需定期验证（≥95%）； 2. 避免亚硝酸盐污染干扰； 3. 高氯离子样品需稀释后检测。

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