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硝酸盐肉汤/用于细菌的硝酸盐还原实验

GB033

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20支

hopebio

见证书

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硝酸盐肉汤介绍：

用途：用于细菌的硝酸盐还原实验。

添加剂：每盒需配套添加1盒HB8282硝酸盐还原试剂使用。

硝酸盐还原试验原理：

有些细菌具有还原硝酸盐的能力，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨或氮气等。亚硝酸盐的存在可用硝酸试剂检验。

结果判断：

编号

产品名称

结果判断

培养时间

备注

阳性

阴性

GB033

硝酸盐肉汤

滴加试剂变红，

或滴加试剂不变红，

继续加入锌粉仍不变红

滴加试剂不变红，

继续加入锌粉后变红

18-24

培养结束后需滴加硝酸盐还原试剂甲液和乙液各

2-3滴，立即观察结果，若变红，则为阳性；

若不变色，继续加入少量锌粉，如仍不变红，

则也为阳性，如变红，则为阴性。

不同细菌在硝酸盐肉汤上的生化反应现象：

硝酸盐肉汤微生物灵敏度试验：

接种以下质控菌株，放置30±1℃需氧培养24±2小时。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

1. 标准名称及标准号

国家标准《GB 4789.38-2012 食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》中规定了硝酸盐还原实验的方法，适用于食品中乳酸菌的鉴定及硝酸盐还原能力的检测。

2. 适用范围

本标准适用于食品、生物制品及环境中需氧和兼性厌氧细菌的硝酸盐还原能力检测，用于判断细菌是否具备将硝酸盐还原为亚硝酸盐或其他产物的代谢特性。

3. 核心检测方法

采用硝酸盐肉汤培养基接种待测菌株，经适宜温度培养后，通过添加格里斯（Griess）试剂观察颜色变化。若肉汤变红，表明硝酸盐被还原为亚硝酸盐；若无显色，需进一步验证是否还原为其他产物。

4. 质控样品要求

需同时接种已知硝酸盐还原阳性的标准菌株（如大肠埃希氏菌ATCC 25922）和阴性对照菌株（如铜绿假单胞菌ATCC 27853），并设置空白培养基对照，确保试剂及操作有效性。

5. 关键实验步骤

① 无菌接种待测菌于硝酸盐肉汤；② 35±1℃培养18-24小时；③ 加入甲液（对氨基苯磺酸）和乙液（α-萘胺）各2滴，轻摇后观察颜色变化；④ 若阴性需补加锌粉排除假阴性。

6. 特别说明

① 部分菌株可能将硝酸盐彻底还原为氮气（脱硝反应），需通过气泡观察或添加Durham管辅助判定；② Griess试剂为致癌物，需在通风橱内操作；③ 培养基需避光保存，防止硝酸盐光解。

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