革兰氏染色液试剂盒/用于细菌的革兰氏染色试验_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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革兰氏染色液试剂盒/用于细菌的革兰氏染色试验

HB8278

Gram Stain Kit

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5ml*8

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详见说明

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革兰氏染色液试剂盒介绍：

操作视频｜革兰氏染色操作

试剂盒组成：

组成	别名	规格	配制依据
溶液A	结晶紫染色液	5ml*2	将1.0g结晶紫完全溶解于20ml 95%乙醇，然后与80ml 1%草酸铵水解液混合。
溶液B	碘液	5ml*2	将1.0g碘与2.0g碘化钾混合，然后加少许蒸馏水充分振摇，待完全溶解，再加蒸馏水至300ml。
溶液C	95%乙醇	5ml*2	/
溶液D	沙黄复染液	5ml*2	将0.25g沙黄溶解于10ml95%乙醇中，然后加90ml蒸馏水稀释。

检验原理：
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此，能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

产品用法：

1.涂片经火焰固定，加（结晶紫溶液）溶液A染1分钟，用清水冲去染液。

2.加（碘液）溶液B染1分钟，水洗。

3.加（95%乙醇）溶液C，不时摇动玻片约10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗。

4.加（沙黄复染液）溶液D，染1分钟，水洗。

5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。

革兰氏染色液试剂盒微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

革兰氏染色液质控结果：

您正在浏览的产品：革兰氏染色液试剂盒

以上信息仅供参考，请以实物批次为准！

本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

革兰氏染色液试剂盒主要用于细菌或真菌的涂片染色，通过革兰氏染色法鉴别革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）。适用于临床标本直接涂片检测、微生物分类鉴定及科研实验中细菌形态学观察[1][3]。

二、核心检测方法

1. 初染：使用结晶紫溶液对细菌涂片进行初染，染色时间1分钟。
2. 媒染：碘液作为媒染剂，与结晶紫形成复合物，增强染色效果，染色时间1分钟。
3. 脱色：95%酒精或丙酮脱色，根据涂片厚度控制脱色时间（20-60秒）。
4. 复染：使用番红或品红溶液复染，使脱色后的革兰氏阴性菌显红色[1][3][5]。

三、检出限与定量限

检出限受涂片厚度、脱色时间及菌龄影响。脱色时间需精确控制（10-20秒），过短可能导致假阳性，过长导致假阴性。推荐使用培养12-24小时的菌种，老龄菌可能影响染色结果[5][7]。

四、质控样品要求

1. 菌种选择：推荐使用大肠杆菌（革兰氏阴性）和金黄色葡萄球菌或枯草杆菌（革兰氏阳性）作为对照。
2. 涂片要求：菌液不可过于浓厚，涂片需均匀干燥，固定时避免过热（以载玻片不烫手为宜）[3][10]。

五、关键实验步骤

1. 涂片固定：通过火焰固定或乙醇自动固定，避免过度加热。
2. 染色顺序：严格遵循初染→媒染→脱色→复染流程，水洗后需吸去多余水分。
3. 脱色控制：根据涂片厚度动态调整脱色时间，避免脱色不足或过度[3][5][8]。

六、特别说明

1. 假阳性/阴性控制：脱色时间、菌龄、涂片厚度均可能影响结果，需规范操作。
2. 染色液储存：结晶紫、碘液、番红需避光保存（2-8℃），酒精可室温存放[1][3][7]。

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