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革兰氏染色液试剂盒/用于细菌的革兰氏染色试验

HB8278

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5ml*8

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见证书

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革兰氏染色液试剂盒介绍：

试剂盒组成：

组成	别名	规格	配制依据
溶液A	结晶紫染色液	5ml*2	将1.0g结晶紫完全溶解于20ml 95%乙醇，然后与80ml 1%草酸铵水解液混合。
溶液B	碘液	5ml*2	将1.0g碘与2.0g碘化钾混合，然后加少许蒸馏水充分振摇，待完全溶解，再加蒸馏水至300ml。
溶液C	95%乙醇	5ml*2	/
溶液D	沙黄复染液	5ml*2	将0.25g沙黄溶解于10ml95%乙醇中，然后加90ml蒸馏水稀释。

检验原理：

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此，能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

用法：

1.涂片经火焰固定，加（结晶紫溶液）溶液A染1分钟，用清水冲去染液。

2.加（碘液）溶液B染1分钟，水洗。

3.加（95%乙醇）溶液C，不时摇动玻片约10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗。

4.加（沙黄复染液）溶液D，染1分钟，水洗。

5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。

革兰氏染色液质控结果：


大肠埃希氏菌O157:H7 ATCC35150	金黄色葡萄球菌ATCC25923

革兰氏染色液试剂盒微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

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产品货号	产品名称	产品规格	产品说明及用途
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HB9177b	mBPWp添加剂2	1ml/支*5	每225mlmBPWp培养基中加入1支HB9177amBPWp添加剂2
HB9177	mBPWp培养基Modified Buffered Peptone Water with Pyruvate	250g	用于0157:H7选择性增菌培养

以上信息仅供参考，请以实物批次为准！

GB 标准：大肠杆菌O157分离培养

适用范围	适用于食品、临床标本中大肠杆菌O157的分离培养，特别针对出血性肠炎和溶血性尿毒综合征的病原检测
核心检测方法	采用CT-SMAC琼脂培养基选择性培养，通过山梨醇发酵差异区分目标菌与非目标菌
质控样品要求	需同步进行阳性对照（ATCC 35150菌株）和阴性对照（大肠杆菌ATCC 25922）培养验证

GB 标准：0157:H7选择性增菌

关键实验步骤	1. 前增菌阶段使用改良EC肉汤（mEC+n） 2. 42℃±1℃振荡培养6小时 3. 转种选择性琼脂培养基
特别说明	需严格控制培养温度和时间，添加新生霉素（20mg/L）抑制杂菌生长

微生物染色通用技术要求

检出限要求	染色后的涂片应在1000倍光学显微镜下清晰显示≥1μm的细菌形态结构
染色步骤规范	1. 结晶紫初染60秒 2. 碘液媒染60秒 3. 乙醇脱色10-30秒 4. 沙黄复染30秒

以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！