革兰氏染色液试剂盒/用于细菌的革兰氏染色试验_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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革兰氏染色液试剂盒/用于细菌的革兰氏染色试验

HB8278

Gram Stain Kit

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5ml*8

hopebio

详见说明

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革兰氏染色液试剂盒介绍：

操作视频｜革兰氏染色操作

试剂盒组成：

组成	别名	规格	配制依据
溶液A	结晶紫染色液	5ml*2	将1.0g结晶紫完全溶解于20ml 95%乙醇，然后与80ml 1%草酸铵水解液混合。
溶液B	碘液	5ml*2	将1.0g碘与2.0g碘化钾混合，然后加少许蒸馏水充分振摇，待完全溶解，再加蒸馏水至300ml。
溶液C	95%乙醇	5ml*2	/
溶液D	沙黄复染液	5ml*2	将0.25g沙黄溶解于10ml95%乙醇中，然后加90ml蒸馏水稀释。

检验原理：
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此，能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

产品用法：

1.涂片经火焰固定，加（结晶紫溶液）溶液A染1分钟，用清水冲去染液。

2.加（碘液）溶液B染1分钟，水洗。

3.加（95%乙醇）溶液C，不时摇动玻片约10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗。

4.加（沙黄复染液）溶液D，染1分钟，水洗。

5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。

革兰氏染色液试剂盒微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

革兰氏染色液质控结果：

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

适用于临床标本、环境样本及食品微生物检测中细菌的形态学鉴别分类，特别针对大肠杆菌O157的分离培养（依据GB标准）[1]。

二、核心检测方法

采用经典四步法：结晶紫初染→碘液媒染→乙醇脱色→沙黄复染。通过细胞壁结构差异区分革兰氏阳性菌（紫色）与阴性菌（红色）[2][4]。

三、检出限与定量限

未明确量化指标，依赖显微镜观察菌体染色特征。建议通过阳性对照菌株验证染色有效性[4]。

四、质控样品要求

每批次实验需包含已知革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌）和阴性菌（如大肠杆菌）作为质控对照，确保染色剂性能稳定[4]。

五、关键实验步骤

1. 涂片固定：菌液均匀薄层涂布，火焰快速固定防止过度加热
2. 初染：结晶紫浸染1-2分钟，水洗去除浮色
3. 媒染：碘液作用1分钟增强染料结合
4. 脱色：乙醇处理10-30秒至无紫色流出（时间依室温调整）
5. 复染：沙黄染色30秒后水洗干燥[4][5]

六、特别说明

1. 脱色时间为关键控制点，需根据环境温度调整：夏季≤30秒，冬季≤60秒
2. 染色失败常见原因：涂片过厚、脱色不充分/过度、菌龄过长（需使用18-24小时新鲜培养物）
3. 染色液开封后需避光保存，结晶紫与碘液出现沉淀应弃用[2][4]

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