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明胶液化生化管(军团菌)/用于军团菌检测_
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明胶液化生化管(军团菌)/用于军团菌检测

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明胶液化生化管(军团菌)介绍:

明胶简介

明胶是胶原部分水解而得到的一类蛋白质,明胶主要用于细菌的生化鉴别,约在2-8℃时会凝固,明胶可被各种细菌的明胶酶水解为氨基酸,而成液化状态,不能再成固态。

用途:用于军团菌检测。

明胶液化试验方法及原理:

方法:取可疑菌落穿刺接种在明胶培养基内,35℃培养24小时,取出后放2-8度冰箱10-30min,如果仍为液体,实验结果为阳性,否则为阴性。

原理:有些细菌具有明胶酶(亦称类蛋白水解酶),能将明胶先水解为多肽,又进一步水解为氨基酸,失去凝胶性质而液化。

注意事项:明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,有可能出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象,并非质量问题,使用前可用水浴或培养箱或其他方法温育,使培养基呈液体流动状,摆直立即可。

结果判断:

编号

产品名称

结果判断

培养时间

备注

阳性

阴性

SN039-1

明胶液化生化管(军团菌)

4℃呈液态

4℃呈固态

24-120

必要时需延长培养3-7天,

培养结束后在4℃下放置30min再观察结果。 

不同细菌在明胶液化生化管上的生化反应现象:

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产品货号产品名称产品规格产品说明及用途
HBPM030-1BCYE(不含L-半胱氨酸盐酸盐)平板9cm(2-8℃)9cm*10用于军团菌的培养
HBPM9302军团菌琼脂培养基平板(医疗)(9cm)9cm*10个/包用于军团菌的分离培养,不具有微生物鉴别和药敏鉴别的作用
HB8496GVPC琼脂基础GVPC Agar Base 100g用于军团菌的分离培养(ISO标准)
HB8493BCYE琼脂基础BCYE Agar Base100g用于军团菌的分离培养(ISO标准)
HB8496aGVPC添加剂5支/套每套添加于100mlGVPC琼脂中
HB8493-1BCYE-CYS琼脂基础BCYE-Cys Agar Base100g用于军团菌的选择性分离培养(ISO标准)
HB8493aL-半胱氨酸盐酸盐(冻干粉)L- Cysteine hydrochloride0.04g*5支/盒每支添加于100ml HB8493 BCYE琼脂基础或99ml HB8580 产H2S菌培养基中
HB8493b可溶性焦磷酸铁Of soluble iron pyrophosphate0.025/支*5每支添加于100mlHB8493或100mlHB8493-1中
HB8485硝酸铁琼脂Ferric nitrate agar250g用于军团菌的选择性分离培养(ISO标准)
HBPM031GVPC琼脂平板(9cm)GVPC Agar Plate9cm*10个/包用于军团菌的选择性分离培养
HB8496-1采样吸收液1-GVPC液体培养基GVPC Liquid Medium100g用于空调系统军团菌采样时吸收液
HB8496-1a采样吸收液1-GVPC液体培养基添加剂1ml*3支/管每套加入100ml采样吸取液1-GVPC液体培养基中
SN047-1硝酸盐肉汤(还原)(军团菌)20支/盒用于军团菌检测
GB124-1马尿酸钠(军团菌)20支/盒用于军团菌检测
SN009-1尿素酶生化管(军团菌)20支用于军团菌检测
SN017-1麦芽糖发酵管(军团菌)20支用于军团菌检测
SN092葡萄糖发酵管(军团菌)20支用于军团菌检测
SN091乳糖发酵管(军团菌)20支用于军团菌检测
HBPT001-6军团菌菌种保存管(1ml)Legionella culture preservation tube1ml*50支/盒用于军团菌的保存
HBPM030BCYE琼脂平板(9cm)BCYE Agar Base 10个/包用于军团菌的选择性分离培养
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循环冷却水中军团菌的检测
适用范围 本文件规定了循环冷却水系统中军团菌的检测方法,适用于工业循环冷却水、中央空调冷却水等水体中军团菌的分离与计数[4]
核心检测方法 采用膜过滤浓缩结合BCYEα选择性培养基培养法,通过菌落形态观察、生化试验(氧化酶/触酶/明胶液化)及血清学鉴定完成检测[4]
检出限与定量限 最低检出限为10 CFU/L,定量检测范围为101-105 CFU/L,采用十倍梯度稀释法进行菌落计数[4]
质控样品要求 每批次需同时进行空白对照(无菌水)和阳性对照(嗜肺军团菌标准菌株ATCC 33152),阳性菌株复苏率需≥70%[4]
关键实验步骤 1. 样品预处理:水样经0.45μm滤膜过滤,酸处理(pH2.0 HCl中和法)消除杂菌干扰
2. 选择性培养:BCYEα培养基36±1℃培养5-7天,CO2浓度保持5%
3. 确证试验:氧化酶/触酶试验阳性,明胶液化试验阳性作为初筛标准[4]
特别说明 1. 需在生物安全二级实验室操作,菌株保存应符合WS 233要求
2. 培养基需每批次进行生长试验验证
3. 检测周期需控制在10个工作日内完成[4]

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