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硝酸盐肉汤（还原）（军团菌）/用于军团菌检测

SN047-1

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20支/盒

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见证书

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硝酸盐肉汤（还原）（军团菌）介绍：

用途：用于军团菌检测。

添加剂：每盒需配套添加1盒HB8282 硝酸盐还原试剂使用。

硝酸盐还原试验原理：

硝酸盐培养基中的硝酸盐可被某些细菌还原为亚硝酸盐，加入对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂，可与亚硝酸盐反应，产生一种红色重氮化合物而呈阳性；硝酸盐还原的最终产物也因细菌种类不同二不同，包括亚硝酸盐、氨、分子氮和一氧化碳等。若加入对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂后不变色，再加入少许锌粉，如果变红，说明培养基中的硝酸盐未被细菌还原而仍然存在，被锌粉还原为亚硝酸盐后与对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂反应显红色，则判定为硝酸盐还原阴性；如果加入锌粉后仍然不变红，说明培养基中的硝酸盐已被还原成亚硝酸盐，进而分解成氨、氮等产物，判定为硝酸盐还原阳性。

结果判断：

编号

产品名称

结果判断

培养时间

备注

阳性

阴性

SN047-1

硝酸盐肉汤

滴加试剂变红，

或滴加试剂不变红，

继续加入锌粉仍不变红

滴加试剂不变红，

继续加入锌粉后变红

24-120

培养结束后需滴加硝酸盐还原试剂甲液和乙液各

2-3滴，立即观察结果，若变红，则为阳性；

若不变色，继续加入少量锌粉，如仍不变红，

则也为阳性，如变红，则为阴性。

不同细菌在硝酸盐肉汤上的生化反应现象：

a：博兹曼军团菌，b：大肠埃希氏菌，c：空白

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

本标准（GB/T 40392-2021）适用于循环冷却水系统中军团菌的检测，包括冷却塔、热交换器等设备中的水质监测。检测对象涵盖人工水体环境中的嗜肺军团菌及其他常见致病菌种[1][4][8]。

二、核心检测方法

主要采用膜过滤结合选择性培养基培养法，包括样本预处理（离心或静置去除杂质）、膜富集、BCYE琼脂平板培养及菌落形态观察。培养温度需控制在36±1℃，培养周期为3-10天[1][4][7]。

三、检出限与定量限

检出限为10 CFU/L，定量限通过膜过滤法可达50 CFU/L。需通过系列稀释法确认有效计数范围，避免高浓度样本导致的菌落重叠[4][8]。

四、质控样品要求

需使用BCYE（缓冲活性炭酵母提取物）培养基作为基础培养基，每批次实验应包含阳性对照（嗜肺军团菌标准菌株）和阴性对照（无菌水）。培养环境需保持2%-5% CO₂浓度以促进菌落生长[7][8]。

五、关键实验步骤

1. 样本预处理：1000 r/min离心1分钟去除悬浮物
2. 膜过滤：使用0.45μm孔径滤膜富集微生物
3. 选择性培养：BCYE琼脂平板36℃培养
4. 菌落鉴定：通过氧化酶试验、苏丹黑染色等生化反应验证[1][4][8]

六、特别说明

1. 与ISO 11731:2017存在方法差异，需注意培养基配方差异
2. 样本运输需在4℃保存且不超过24小时
3. 实验室需达到生物安全二级防护标准
4. 阳性结果需结合临床特征进行流行病学判断[1][8]

[1] GB/T 40392-2021循环冷却水中军团菌的检测 [4] GBT40392-2021 循环冷却水中军团菌的检测 (2).pdf [7] 军团菌属检验标准操作规程 [8] GB∕T 40392-2021 循环冷却水中军团菌的检测（正式版）

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