10385-HQB 生孢梭菌定量标准菌株/GB/T 5750.12-2023 生活饮用水标准检验方法第12部分：微生物指标产气荚膜梭状芽孢杆菌滤膜法_质控样品_菌种_标准物质_萘析商城

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10385-HQB 生孢梭菌定量标准菌株/GB/T 5750.12-2023 生活饮用水标准检验方法第12部分：微生物指标产气荚膜梭状芽孢杆菌滤膜法

C0172

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2支/盒

CICC

定量/10~100 CFU/100 mL

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生活饮用水中产气荚膜梭状芽孢杆菌检验阴性对照、培养基检验

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适用范围	适用于食品及发酵工业中生孢梭菌（Clostridium sporogenes）CICC 10385菌株的种水平鉴定，包括基于全基因组测序的分子生物学分析及生理生化特征验证[1]。

核心检测方法

1. 全基因组测序：使用BGISEQ-500测序仪分析基因组大小、contig数量及GC含量。
2. 平均核苷酸一致性（ANI）分析：与参考菌株（如生孢梭菌DSM 795~T）进行基因组比对，阈值≥99%判定为同种。
3. 生理生化特征验证：通过形态学及代谢特性辅助鉴定[1]。

检出限与定量限

1. 基因组测序检出限：单菌落纯培养物DNA浓度≥0.5 ng/μL。
2. ANI定量限：有效测序数据覆盖率≥95%，测序深度≥50×[1]。

质控样品要求

1. 菌株活性：需保证活菌浓度≥1×10^8 CFU/mL。
2. 纯度验证：通过平板划线及显微镜观察确认无杂菌污染[1]。

关键实验步骤

1. 菌株活化：在厌氧条件下使用强化梭菌培养基（RCM）培养24-48小时。
2. DNA提取：采用CTAB法或商业化试剂盒提取高质量基因组DNA。
3. 测序数据预处理：去除低质量序列及接头污染[1]。

特别说明	1. 需使用国际标准菌株库（如DSMZ）的参考菌株进行ANI比对。 2. 生理生化试验需在严格厌氧环境下操作以避免假阳性结果[1][3]。

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