卵黄琼脂培养基/用于产气荚膜梭菌的卵磷脂酶试验(GB/T5750.12-2023 生活饮用水标准)_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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卵黄琼脂培养基/用于产气荚膜梭菌的卵磷脂酶试验(GB/T5750.12-2023 生活饮用水标准)

HB0262-1

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250g

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见证书

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卵黄琼脂培养基介绍：

用途:用于产气荚膜梭菌的卵磷脂酶试验。

添加剂：每瓶需配套添加 10盒 HB8295 50%卵黄乳液使用，每支添加于50ml卵黄琼脂培养基。

成分(g/L)：

蛋白胨	15.0
肉浸粉(来自1000ml肉浸液)	3.0
氯化钠	5.0
琼脂	15.0
葡萄糖	10.0
pH值7.5±0.1	25℃

检验原理蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供能源；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；产气荚膜梭菌具有卵磷脂酶分解卵磷脂生成不溶性甘油酯形成乳白色的混浊带。

用法

称取本品48.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,加入50%卵黄乳液100ml,摇匀,倾入无菌平皿。

不同细菌在卵黄琼脂培养基基础上的生长特征：

金黄色葡萄球菌

乳白色菌落，无浑浊带

产气荚膜梭菌

乳白至淡黄色菌落，有较大浑浊带

卵黄琼脂培养基原理及现象：

卵磷脂实验操作视频：

卵黄琼脂培养基基础微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃厌氧培养18-24小时。注：回收率计算时，用TSC琼脂做对照培养基。

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一、适用范围

用于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌（椰毒假单胞菌酵米面亚种）和产气荚膜梭菌的卵磷脂酶试验检测，适用于食品微生物检验及临床微生物分离培养[1][3]。

二、核心检测方法

基于卵磷脂酶分解卵黄中卵磷脂的原理，通过观察菌落周围形成的乳白色混浊环或浑浊带判定目标菌活性，需配合厌氧培养条件（36±1℃, 24-48h）进行特异性检测[1][2][6]。

三、检出限与定量限

典型检出限为10-100 CFU/g（依据样品类型），定量限需通过标准菌株梯度稀释验证，推荐使用产气荚膜梭菌HK9051作为阳性对照[6]。

四、质控样品要求

必须包含唐菖蒲伯克霍尔德氏菌CICC10574（4天培养后应出现虹彩现象）及产气荚膜梭菌HK9051（24h内形成浑浊带），质控菌株传代不超过5代[1][6]。

五、关键实验步骤

1. 基础培养基灭菌（121℃, 15min）；
2. 无菌添加50%卵黄盐水悬液（终浓度5-7.5%）；
3. 倾注平板时温度严格控制在50±2℃；
4. 点种法接种，避免划线破坏卵黄分布[2][6]。

六、特别说明

1. 卵黄悬液需经70%乙醇表面消毒后无菌取用；
2. 培养基避光保存（2-25℃），开封后需48h内使用；
3. 检测产气荚膜梭菌时必须同步设置阴性对照[1][6]。

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