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大肠杆菌菌片8099(布片载体)(含菌量: 1x106一5x106cfu/片)/用于非汽雾或超低容量喷雾的消毒方式的消毒效果评价指标微生物(WS/T 683)_
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大肠杆菌菌片8099(布片载体)(含菌量: 1x106一5x106cfu/片)/用于非汽雾或超低容量喷雾的消毒方式的消毒效果评价指标微生物(WS/T 683)

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大肠杆菌菌片8099(布片载体)(含菌量: 1x106一5x106cfu/片)介绍:

用途:用于非汽雾或超低容量喷雾的消毒方式的消毒效果评价指标微生物。

菌片菌量的确定:

  用无菌镊子取一片菌片,投入到5mL无菌生理盐水管中,用电动混匀器振荡混匀20秒,将菌洗下形成菌悬液,计为0管。从0管吸取500μL菌液至4.5mL无菌生理盐水管中,用电动混匀器振荡混匀20秒,得到-1管,从-1管吸取500μL菌液至4.5mL无菌生理盐水管中,用电动混匀器振荡荡混匀20秒,得到-2管。从-2管吸取500μL菌液至4.5mL无菌生理盐水管中,用电动混匀器震荡混合20秒,得到-3管。从-3管中吸取100μL菌液涂布TSA后培养计数。(如果采用倾注法计数应进一步稀释至-4梯度管,然后吸取1mL菌液至无菌平皿内,取40-45℃TSA培养基倾注平板,每平皿倾注15-20mL,充分混匀自然凝固后培养计数。)平板菌落数在20-100CFU,则说明原0管中洗脱下来的菌量在(1-5)*106CFU,即每片菌片有效回收菌量在(1-5)*106CFU/片。详细操作步骤见下图:

产品简介  根据《疫情期间现场消毒评价标准WS/T 774-2021》中对消毒因子的抗力选择指示微生物大肠杆菌(8099)制作而成,用于常温或低温环境现场消毒效果评价。化学消毒时,对消毒因子的抗力与标准要求相当、易于培养且符合实验室生物安全和《WS/T 683》标准的要求。一般情况下,可选择布片载体,当使用气雾或超低容量喷雾等消毒方式时,应选择金属片载体进行评定。

使用方法  1.消毒前,按照布点要求,将菌片放置于消毒评价现场;  2.消毒达到作用时间后,用无菌镊子将菌片移入装有5.0 mL 相应中和剂试管中,在手心振打80 次或用混匀器混匀,中和10 min。  3.设立阳性对照组。低温现场消毒时,阳性对照组与试验组一起放入相应低温环境,达到相同低温后,放入稀释液中。  4.将采样管在混匀器上振荡20 s 或在手心振打80 次,吸取1.0 mL 待检样品接种于无菌平皿,每一个样本平行接种2 个平皿,并按标准要求使用相应的培养基接种培养。  5.计数菌落数,计算杀灭率。

菌片具体使用方法:

菌片使用中注意事项:

  1、做消毒剂杀菌测试时,应将菌面朝上(布片无需分辨正反面)。

  2、用镊子夹取菌片时,先用酒精棉擦拭镊子或用酒精灯灼烧镊子前端,待冷却后再夹取菌片,注意不要触碰到中心的菌,以免菌沾在镊子上造成菌量损失。

  3、振荡稀释时需使用电动混合器,且需调整至最大振荡力度,每次均需振荡20S,确保菌片上的菌可以有效洗脱并混匀。

  4、涂布或倾注法计数时需保证菌液被完全涂开或混匀,避免菌落连在一起难以计数。

保存条件

  -18℃以下冷冻保存,有效期6个月。

说明书下载:

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GB/T 38502-2020 消毒剂实验室杀菌效果检验方法

适用范围:
本标准适用于消毒剂对细菌繁殖体、真菌、病毒等微生物的实验室杀菌效果评价,包含悬液定量法和载体浸泡法两种检测体系。特别适用于评价布片载体类消毒产品(如大肠杆菌菌片8099)的杀菌效能[2][5]。
核心检测方法:
1. 悬液定量法:通过稀释中和法测定消毒剂对微生物的杀灭对数值,要求对大肠杆菌8099的杀灭对数值≥5.00;
2. 载体浸泡法:使用布片等载体进行模拟现场试验,要求低温环境下作用时间与温度需符合产品说明书规定[2][5]。
检出限与定量限:
载体法的微生物检出限为≥1×10³ CFU/片,定量限需满足试验组杀灭对数值≥3.00(常温)或≥1.00(低温),对照组菌量应在5×10⁵~5×10⁶ CFU/片范围内[2][5]。
质控样品要求:
1. 阳性对照组菌量需达到5×10⁵~5×10⁶ CFU/片;
2. 低温试验时,菌片需在目标温度下平衡30分钟以上;
3. 中和剂需通过验证试验确认有效性[2][5]。
关键实验步骤:
1. 菌片预处理:将染菌载体干燥后置于实验温度环境平衡;
2. 消毒处理:按说明书浓度和时间进行消毒;
3. 中和与培养:使用无菌操作转移菌片至中和剂,振摇后接种培养;
4. 结果计算:比较试验组与对照组的菌落数差异[2][5]。
特别说明:
1. 低温试验需全程维持目标温度(如-18℃),操作需在低温箱内完成;
2. 载体材质需与实际应用一致(如布片载体需符合WS/T 774-2021要求);
3. 重复性验证需分不同批次独立完成[2][5]。

WS/T 774-2021 疫情期间现场消毒评价标准

适用范围:
本标准规定了大肠杆菌8099作为指示微生物在常温/低温现场消毒效果评价中的使用方法,适用于医疗机构、冷链物流等场景的消毒验证[2]。
核心检测方法:
采用布片载体模拟现场消毒,要求消毒前后菌片回收菌量比达到1×10⁶~5×10⁶ CFU/片,杀灭率计算需≥99.9%[2]。
质控要求:
1. 现场试验需设置未处理阳性对照;
2. 采样后需在2小时内进行微生物检测[2]。
[2] GB/T 38502-2020 消毒剂实验室杀菌效果检验方法 [5] WS/T 774-2021 疫情期间现场消毒评价标准

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