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肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品

BNCC378809

Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae DNA lab quality control

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冻存管；10^5~10^6copies/mL；10管/盒

北纳生物/BNCC

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肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品介绍：

产品中文名称：肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品
产品英文名称：Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae DNA lab quality control
参考用途：本质控品由河南省工业微生物菌种工程技术研究中心研制，为肺炎克雷伯菌灭活悬液，通过添加稳定剂、数字PCR定值后分装而得，可用于方法建立、工作标准赋值、方法确认与评价、产品质量控制等。
形态特性：菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面灰白色，表面光滑，中间凸起，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯
培养基：蛋白胨：10.0g，牛肉粉：3.0g，氯化钠：5.0g，琼脂：15.0g，pH值：7.3±0.1(25℃)
培养条件：/
培养方法：从冰箱取出，完全融化后，涡旋振荡混匀，即可使用。注意：本质控品为灭活颗粒，需提取核酸后使用，提取或纯化试剂需自备，提取前避免反复冻融。
存储形式：-80℃
提供形式：冻存管；10^5~10^6copies/mL；10管/盒
备注：/

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

标准名称及标准号

GB/T 27403-2008
实验室质量控制规范食品分子生物学检测

适用范围

适用于分子生物学检测实验室的质量控制，包括核酸提取、PCR扩增等检测流程。涵盖细菌病原体核酸（如肺炎克雷伯菌）的定性与定量检测，明确要求室内质控品的使用规范。

核心检测方法

1. 实时荧光定量PCR (qPCR)：标准推荐方法，通过荧光信号实时监测靶标DNA扩增
2. 核酸提取要求：使用经验证的提取试剂盒，确保DNA纯度（A260/A280=1.8-2.0）
3. 扩增体系验证：引物/探针需进行特异性、灵敏度验证
4. 扩增程序：包含预变性、变性-退火-延伸循环（通常40个循环）

检出限与定量限

1. 检出限(LOD)：可稳定检出的最低核酸量（通常≤50拷贝/反应）
2. 定量限(LOQ)：满足精密度要求（CV≤25%）的最低定量浓度
3. 验证要求：需使用梯度稀释的质控品进行≥20次重复测试

质控样品要求

质控类型	要求
阳性对照	含肺炎克雷伯菌特异性靶序列（如khe基因），浓度接近LOQ
阴性对照	无靶标核酸的基质溶液（如TE缓冲液）
过程对照	添加内标（如管家基因）监控提取效率
稳定性	开瓶稳定性≤7天（2-8℃），冻存稳定性≥6个月（-70℃）

关键实验步骤

1. 分区操作：试剂准备区、样本处理区、扩增区分开
2. 防污染措施：紫外消毒工作台，使用UNG酶防产物污染
3. 加样顺序：先加阴性对照→待测样本→阳性对照
4. 扩增曲线判读：CT值需在标准曲线线性范围内（通常15 5. 质控验收：阳性对照CT值波动需≤1.5个循环

特别说明

1. 亚种鉴别：需验证引物对肺炎克雷伯菌肺炎亚种/鼻硬结亚种的特异性
2. 抑制剂监控：样本需添加内标监控PCR抑制物（CT延迟≥3循环需重新提取）
3. 定量校准：每批次需运行标准曲线（R²≥0.99，斜率-3.0~-3.5）
4. 污染处理：出现假阳性时必须进行污染源调查并记录纠正措施

以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！