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肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品

BNCC378811

Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae DNA lab quality control

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冻存管；10^5~10^6copies/mL；10管/盒

北纳生物/BNCC

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肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品介绍：

产品中文名称：肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品
产品英文名称：Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae DNA lab quality control
参考用途：本质控品由河南省工业微生物菌种工程技术研究中心研制，为肺炎克雷伯菌灭活悬液，通过添加稳定剂、数字PCR定值后分装而得，可用于方法建立、工作标准赋值、方法确认与评价、产品质量控制等。
形态特性：菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面灰白色，表面光滑，中间凸起，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯
培养基：蛋白胨：10.0g，牛肉粉：3.0g，氯化钠：5.0g，琼脂：15.0g，pH值：7.3±0.1(25℃)
培养条件：/
培养方法：从冰箱取出，完全融化后，涡旋振荡混匀，即可使用。注意：本质控品为灭活颗粒，需提取核酸后使用，提取或纯化试剂需自备，提取前避免反复冻融。
存储形式：-80℃
提供形式：冻存管；10^5~10^6copies/mL；10管/盒
备注：/

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

国家标准解读：

标准名称及标准号	GB/T 27403-2008《实验室质量控制规范食品分子生物学检测》
该标准规定了分子生物学检测实验室的质量控制要求，涵盖核酸提取、扩增和检测全过程的质量管理。

适用范围

适用于所有使用分子生物学方法检测核酸的实验室，包括：

1. 病原微生物核酸检测
2. 转基因成分检测
3. 物种鉴定分析
4. 本规范涵盖肺炎克雷伯菌等细菌的DNA检测质控要求

核心检测方法

1. 实时荧光定量PCR (qPCR)
2. 常规PCR扩增技术
3. 核酸杂交技术
4. 标准要求每次检测必须包含阳性/阴性对照和空白对照

检出限与定量限

1. 检出限(LOD)：要求≤10拷贝/反应
2. 定量限(LOQ)：要求≤50拷贝/反应
3. 验证要求：需使用梯度稀释的质控品进行验证
4. 每批检测必须包含接近LOD浓度的弱阳性对照

质控样品要求

1. 基质要求：需与实际样本基质匹配
2. 浓度梯度：应包含高、中、低三个浓度水平
3. 稳定性：-70℃保存≤1年，避免反复冻融(≤3次)
4. 验证要求：新批次需与旧批次进行平行比对
5. 肺炎克雷伯菌DNA质控品需包含特异性靶基因（如khe基因）

关键实验步骤

1. 核酸提取：使用经验证的方法，提取效率应≥70%
2. 扩增体系配制：在独立洁净区操作，使用防气溶胶吸头
3. 扩增程序：需验证退火温度(肺炎克雷伯菌通常60-62℃)
4. 污染防控：实验分区进行，定期用10%次氯酸钠消毒
5. 结果判读：Ct值需在标准曲线线性范围内(通常15

特别说明

1. 质控品需进行均匀性验证：瓶间差异CV≤10%
2. 建立质控图：采用Levey-Jennings质控图监控检测过程
3. 使用独立来源质控品：与校准品不同生产批号
4. 出现假阳性时需排查：
   - 试剂污染
   - 扩增产物污染
   - 样本交叉污染
5. 肺炎克雷伯菌检测需注意：
   - 与相似菌种(如产酸克雷伯菌)的引物特异性验证
   - 高浓度样本需梯度稀释防止PCR抑制

以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！