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肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品

BNCC378816

Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae DNA lab quality control

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冻存管；10^7~10^8copies/mL；10管/盒

北纳生物/BNCC

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肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品介绍：

产品中文名称：肺炎克雷伯菌亚种脱氧核糖核酸液体室内质控品
产品英文名称：Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae DNA lab quality control
参考用途：本质控品由河南省工业微生物菌种工程技术研究中心研制，为肺炎克雷伯菌亚种灭活悬液，通过添加稳定剂、数字PCR定值后分装而得，可用于方法建立、工作标准赋值、方法确认与评价、产品质量控制等。
形态特性：菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面灰白色，表面光滑，中间凸起，表面明亮，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌，纯度：纯
培养基：蛋白胨：10.0g，牛肉粉：3.0g，氯化钠：5.0g，琼脂：15.0g，pH值：7.3±0.1(25℃)
培养条件：培养温度37℃；培养时间18-24小时；气体环境好氧；
培养方法：从冰箱取出，完全融化后，涡旋振荡混匀，即可使用。注意：本质控品为灭活颗粒，需提取核酸后使用，提取或纯化试剂需自备，提取前避免反复冻融。
存储形式：-80℃
提供形式：冻存管；10^7~10^8copies/mL；10管/盒
备注：/

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

实验室质量控制规范食品分子生物学检测

标准名称及标准号

GB/T 27403-2008《实验室质量控制规范食品分子生物学检测》

适用范围	适用于食品中病原微生物核酸的检测实验室质量控制，涵盖PCR等分子生物学检测全流程的规范要求。

核心检测方法

1. 实时荧光定量PCR（qPCR）技术
2. 要求使用特异性引物探针
3. 熔解曲线分析验证扩增特异性
4. 标准曲线法定量分析

检出限与定量限

1. 检出限(LOD)：≤100 copies/μL
2. 定量限(LOQ)：≤500 copies/μL
3. 需通过梯度稀释实验验证

质控样品要求

1. 室内质控品需包含靶序列（如肺炎克雷伯菌特异基因片段）
2. 浓度梯度：至少包含阴性质控、临界值质控、中/高浓度质控
3. 稳定性：-70℃保存期≥6个月
4. 均匀性：批内CV≤15%

关键实验步骤

1. 核酸提取：使用已验证的提取试剂盒
2. 体系配制：在独立洁净区操作
3. 扩增程序：按照验证参数执行
4. 数据分析：阈值循环数(Ct值)判读需统一标准
5. 每批实验必须包含：
  - 阴性对照（无模板）
  - 阳性对照（标准物质）
  - 环境空白对照

特别说明	1. 严格分区管理：试剂配制区、样品处理区、扩增区分隔独立 2. 防污染措施：使用UNG酶防产物污染 3. 扩增效率要求：90%-110% 4. 标准曲线R²≥0.98 5. 质控频率：每批次检测≥10%样品需平行加测质控品

出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法

标准名称及标准号

SN/T 1870-2016《出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法》

适用范围	适用于食品中肺炎克雷伯菌等食源性致病菌的快速筛查，特别针对进出口检验场景。

核心检测方法

1. 特异性引物设计：针对肺炎克雷伯菌phoE基因
2. TaqMan探针技术
3. 快速前处理：增菌时间≤18h
4. 双重对照体系：内标+外标同步监控

检出限与定量限

1. 纯菌检出限：≤10 CFU/反应
2. 食品基质检出限：≤100 CFU/g
3. 定量范围：10²-10⁷ CFU/mL

质控样品要求

1. 阳性对照：含肺炎克雷伯菌特异DNA片段
2. 内标质控：监控核酸提取效率
3. 基质匹配：需使用食品基质加标样品验证
4. 冻融次数：≤3次

关键实验步骤

1. 样品前处理：缓冲蛋白胨水增菌
2. 双模板控制：每反应孔含待测样本+内标系统
3. 扩增参数：95℃预变性3min；95℃ 15s→60℃ 45s（40循环）
4. 结果判读：
- FAM通道Ct≤35为阳性
- HEX通道失效需重检

特别说明	1. 交叉反应验证：需排除其他克雷伯菌属干扰 2. 抑制剂监控：内标Ct值偏移≥3需重新提取 3. 临界值判定：建立灰区范围（Ct值35-38） 4. 确认实验：阳性样品需做生化验证

以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！