甲醇中6种儿茶素类和咖啡因混合溶液标准物质(套标)/GB/T 8313-2018
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乙腈中三唑磷标准品
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水中2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)溶液
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水中昆布三糖溶液
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二氯甲烷甲醇中MK-9溶液
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GB/T 8313-2018 《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》
适用于绿茶、红茶、乌龙茶等各类茶叶中儿茶素类(EGCG、ECG、EGC、EC等)及咖啡因的含量测定,包括固态茶、液态茶制品及速溶茶粉
采用高效液相色谱法(HPLC)进行分离检测:
1. 色谱柱:C18反相色谱柱(粒径5μm,柱长250mm)
2. 流动相:A相-乙腈/乙酸水溶液,B相-纯水
3. 梯度洗脱程序:0-20min B相70%→50%,20-25min B相50%→0%
4. 检测波长:278nm(儿茶素类),273nm(咖啡因)
5. 柱温:35±1℃
1. 儿茶素类检出限(LOD):0.05-0.10mg/L
2. 定量限(LOQ):0.15-0.30mg/L
3. 咖啡因检出限:0.08mg/L
4. 定量限:0.25mg/L
(基于3倍信噪比计算LOD,10倍信噪比计算LOQ)
1. 标准曲线:需覆盖0.01-1.00mg/mL浓度范围(R²≥0.999)
2. 每批次检测需包含空白对照和加标回收实验
3. 平行样数量:每10个样品至少1个平行样
4. 回收率控制范围:儿茶素类85-105%,咖啡因88-110%
5. 保留时间偏差:≤±0.1min
样品前处理:
1. 粉碎:茶叶样品过40目筛
2. 提取:0.2g样品+5mL 70℃甲醇溶液,水浴提取10min
3. 离心:4000rpm离心5min取上清液
4. 定容:提取液用流动相稀释至10mL
5. 过滤:0.22μm有机系滤膜过滤
上机检测:
1. 系统平衡:流动相平衡≥30min
2. 进样量:10μL
3. 流速控制:1.0mL/min±0.02
4. 每批样品后需冲洗色谱柱30min
1. 标准物质要求:需使用有证标准物质(如甲醇中6种儿茶素类和咖啡因混合溶液),证书需包含不确定度信息
2. 稳定性要求:标准工作液现配现用(4h内),避光保存
3. 干扰消除:茶黄素类化合物可能干扰ECG检测,需通过梯度洗脱程序分离
4. 系统适用性:理论塔板数应≥5000(咖啡因峰),分离度≥1.5(EGCG与GCG峰)
5. 当样品中咖啡因含量>5%时,需稀释后重新检测
以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!