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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。
标准名称及标准号
GB 5009.262-2016《食品安全国家标准 食品中维生素D的测定》,适用于乳粉等食品基质中维生素D(含D₂和D₃)的定量分析
适用范围
适用于婴幼儿配方乳粉、调制乳粉及其他含脂固体食品中维生素D的定量检测。检测浓度范围需满足0.5-100 μg/100g的样品含量要求
核心检测方法
采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)为基准方法,包含以下关键环节:
1. 皂化提取:碱性条件下水解样品中的甘油三酯
2. 液液萃取:用正己烷萃取脂溶性维生素
3. 净化处理:采用固相萃取柱(SPE)去除干扰物
4. 色谱分离:C18反相色谱柱,甲醇-水梯度洗脱
5. 质谱检测:多反应监测模式(MRM),定性定量离子对分别为m/z 381>159(D₃)和m/z 397>379(D₂)
检出限与定量限
方法检出限(LOD):0.1 μg/100g(以乳粉计)
定量限(LOQ):0.3 μg/100g(以乳粉计)
当样品浓度>LOQ时,回收率应控制在85%-110%范围内
质控样品要求
1. 基质匹配:必须使用乳粉基质的标准物质
2. 浓度梯度:应包含低、中、高三个浓度水平(如0.5/5/50 μg/100g)
3. 稳定性验证:开封后需在-20℃避光保存,有效期验证通过后方可使用
4. 认证要求:必须附带可溯源至国家计量院(NIM)的证书
关键实验步骤
1. 皂化处理:取1g样品加入10mL乙醇和1mL抗坏血酸溶液,80℃水浴皂化30min
2. 萃取:加入10mL正己烷振荡萃取,离心后取上清液氮吹浓缩
3. SPE净化:C18柱依次用5mL甲醇、5mL水平衡,上样后5mL水淋洗,6mL甲醇洗脱
4. 重新溶解:40℃氮吹至干,用1mL甲醇复溶并过0.22μm滤膜
5. 仪器分析:进样量10μL,柱温35℃,流速0.3mL/min
特别说明
1. 前处理全程需避光操作,防止维生素D光解
2. 必须进行同位素内标校正(推荐使用d₃-维生素D₃)
3. 每批样品需同步进行空白试验和加标回收试验
4. 当检出维生素D₂时,需确认是否源自天然存在或外源污染
5. 方法精密度要求:平行样相对偏差≤10%
以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!