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溴化十六烷基三甲铵琼脂（颗粒）（2025药典）/用于绿脓假单胞菌的分离培养（2025药典）

HBKP5184-311

Cetrmide Agar

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250g

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见证书

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溴化十六烷基三甲铵琼脂（颗粒）（2025药典）介绍：

用途：用于绿脓假单胞菌的分离培养（2025药典）。

成分（g/L）

明胶胰酶水解物	20.0
氯化镁	1.4
硫酸钾	10.0
溴化十六烷基三甲铵	0.3
琼脂	13.6
pH值7.2±0.2	25℃

检验原理：

明胶胰酶水解物提供碳氮源、维生素和生长因子；溴化十六烷基三甲铵为选择性抑菌剂，作为一种季铵盐阳离子去污剂可释放细菌细胞中的氮和磷而抑制非绿脓杆菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：

称取本品45.3g，加热溶解于1000ml纯化水中，加入甘油10ml，煮沸使混合均匀，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，冷至50℃时，倾入无菌平皿，备用。

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国家标准解读：食品安全国家标准培养基和试剂的质量要求

标准名称及标准号	GB 4789.28-2024 食品安全国家标准培养基和试剂的质量要求
适用范围	适用于食品微生物检验中培养基和试剂的性能评价及质量控制，包括选择性培养基如溴化十六烷基三甲铵琼脂的适用性验证。
核心检测方法	规定培养基的理化特性（pH、凝胶强度）、选择性和生长能力验证方法，需通过目标菌（绿脓假单胞菌）和非目标菌的接种试验。
检出限与定量限	目标菌在选择性培养基上的回收率应≥50%（与非选择性培养基对比），非目标菌应被完全抑制。
质控样品要求	需使用标准菌株（如铜绿假单胞菌ATCC 9027）及干扰菌株（如大肠埃希氏菌ATCC 25922）进行性能验证。
关键实验步骤	1. 培养基配制后需进行无菌性检查； 2. 目标菌悬液梯度稀释后接种，观察典型菌落形态； 3. 与非选择性培养基对比计算回收率。
特别说明	使用前需进行预培养试验，确认培养基批次间一致性；若用于药典检测，需同步满足药典无菌检查法的附加要求。

行业标准解读：GB 7918.4-2023 化妆品安全技术规范第4部分：微生物检验方法

标准名称及标准号	GB 7918.4-2023 化妆品安全技术规范第4部分：微生物检验方法
适用范围	适用于化妆品中铜绿假单胞菌等致病菌的分离培养，明确溴化十六烷基三甲铵琼脂作为选择性培养基的应用条件。
核心检测方法	样品经增菌后划线接种于琼脂平板，36℃培养24-48小时，观察典型黄绿色菌落并进行氧化酶试验验证。
检出限与定量限	方法检出限为1 CFU/g，定量限需通过阳性样品添加试验确认，回收率应≥70%。
质控样品要求	每批次检测需包含阴性对照（无菌生理盐水）和阳性对照（铜绿假单胞菌标准菌株）。
关键实验步骤	1. 样品预处理需加入中和剂消除防腐剂干扰； 2. 平板培养后需在紫外灯下观察荧光特性； 3. 需进行革兰氏染色确认。
特别说明	当样品含油性成分时，需先用吐温80进行乳化处理；培养时间超过48小时可能产生假阳性。

国家标准解读：生活饮用水标准检验方法微生物指标

标准名称及标准号	GB/T 5750.12-2023 生活饮用水标准检验方法微生物指标
适用范围	涵盖饮用水及水源中铜绿假单胞菌的检测，规定膜过滤法结合溴化十六烷基三甲铵琼脂的使用规范。
核心检测方法	水样经0.45μm滤膜过滤后，将滤膜贴于琼脂表面，36℃培养40-48小时计数典型菌落。
检出限与定量限	方法最低检出浓度为1 CFU/250mL，定量范围1-100 CFU/膜。
质控样品要求	每10个样品需做1个空白对照（无菌水），阳性对照菌悬液浓度应控制在50-150 CFU/mL。
关键实验步骤	1. 滤膜灭菌后需预润湿； 2. 培养后需进行细胞色素氧化酶试验； 3. 采用API 20NE系统进行生化确认。
特别说明	水样中含余氯时需立即加入硫代硫酸钠中和；高浊度样品需先进行离心前处理。

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