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乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌定量分析质控样品(阳性)_
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乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌定量分析质控样品(阳性)

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乳粉中单核细胞增生李斯特氏菌定量分析质控样品(阳性)介绍:


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食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验
标准名称及标准号 GB 4789.30-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》
发布日期:2016-12-23 | 实施日期:2017-06-23
适用范围 1. 适用于各类食品(包括乳粉)中单核细胞增生李斯特氏菌的定性检验
2. 特别适用于定量分析中的MPN计数法(最可能数法)
3. 包含样品前处理、增菌培养、分离鉴定全流程
核心检测方法 MPN定量检测法
1. 样品制备:25g样品+225mL LB1增菌液,均质
2. 一级增菌:30℃培养24h±2h
3. 二级增菌:转种LB2增菌液,30℃培养24h±2h
4. 分离培养:接种PALCAM/显色培养基,36℃培养24-48h
5. 鉴定:溶血试验、生化鉴定(糖发酵试验)、协同溶血试验
检出限与定量限 1. MPN法检出限:3.0 MPN/g(三管法最低稀释度)
2. 定量范围:3.0~1100 MPN/g
3. 定量依据:根据阳性管数量查MPN表计算结果
4. 灵敏度要求:可检测≥10 CFU/g的污染水平
质控样品要求 1. 阳性对照:使用ATCC 19115等标准菌株
2. 阴性对照:无菌生理盐水或培养基空白
3. 定量质控样:已知浓度(如10-100 CFU/g)的乳粉基质样品
4. 质控频率:每批次实验需同步进行
5. 接受标准:阳性对照须100%检出,阴性对照须无菌生长
关键实验步骤 1. 样品均质:确保乳粉完全溶解,无结块
2. 增菌控制:LB1/LB2培养时间精确到±2h
3. 平板分离:PALCAM平板培养需微需氧环境(5% O₂)
4. 典型菌落识别:PALCAM上灰绿色菌落,显色培养基蓝色菌落
5. 鉴定确认:必须完成溶血试验和生化鉴定全套流程
特别说明 1. 生物安全要求:需在BSL-2实验室操作
2. 干扰物质处理:乳粉中抑菌成分需添加中和剂
3. 方法验证:新实验室需进行方法确认(灵敏度≥50%)
4. 结果报告:MPN值保留两位有效数字
5. 菌株保存:阳性分离株需-70℃保存至少3个月

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