副溶血性弧菌成套生化鉴定管（SN/T0173-2010)/用于副溶血性弧菌的生化鉴定_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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副溶血性弧菌成套生化鉴定管（SN/T0173-2010)/用于副溶血性弧菌的生化鉴定

SHBS08-1

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16种*1套/盒*5盒

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见证书

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副溶血性弧菌成套生化鉴定管（SN/T0173-2010)介绍：

添加剂：需配套添加

1盒 HB8281 V-P试剂盒

1盒 HB8279 kovacas靛基质试剂盒

1盒 GS070 无菌液体石蜡

使用方法：

1.实验准备：

从包装盒中取出安瓿瓶，用砂轮在瓶颈上划一圈，朝易折点（瓶颈上方蓝点），反方向用力折开安瓿瓶，插入安瓿瓶试管架中。如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。

2.接种方法：

从选择性琼脂平板(TCBS琼脂或副溶血性弧菌显色培养基)上至少选取2个典型菌落或可疑菌落，每个菌落分别接种到无盐胰胨水、3%氯化钠胰胨水、氯化钠三糖铁琼脂进行鉴别试验，本套成套生化管不含氯化钠三糖铁琼脂。其它的生化管是否进行接种，请参照SN0173标准判断结果。

直接接种：

用接种针从平板上挑取已纯化培养的同一菌落接种于需要试验的生化管中。

菌悬液法：

取一内盛2ml无菌水或无菌生理盐水试管，用接种针从纯化培养的平板上挑取单个菌落至无菌水中仔细研磨制成0.5麦氏浊度的均一细菌悬液，滴入需要试验的试管中，每管3滴。其中固体和半固体生化管采用穿剌接种。

3.接种完后置36±1℃培养（42℃生长置42℃培养）。（用封口膜封口，封口膜应用75%酒精擦拭灭菌，成套生化管中附带有）

需滴加试剂明细表

副溶血性弧菌成套生化鉴定管质量控制：

按使用说明进行操作，接种后置37℃培养。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

本标准（SN/T 0173-2010）适用于进出口食品中副溶血性弧菌的定性和定量检测，包括定性检测方法和最近似值（MPN）计数方法。其适用范围覆盖动物性水产品、生食水产品、即食藻类食品等，同时也可作为动物饲料及食品生产加工区域环境样品的参照检测依据[2]。

二、核心检测方法

检测方法分为两类：
1. 定性检测：通过选择性增菌培养（如碱性蛋白胨水）、分离培养（TCBS琼脂或显色培养基）及生化鉴定（包括耐盐性试验、氨基酸脱羧酶试验等）确认目标菌存在。
2. MPN定量检测：采用三管九步法对样品进行系列稀释，结合选择性培养基和生化反应结果计算菌落浓度[2]。

三、检出限与定量限

本标准未明确具体数值要求，但规定定性检测需在增菌后检出目标菌，MPN法则需根据样品稀释梯度及阳性反应管数计算理论浓度范围。实际应用中，MPN法的检测灵敏度通常为3 CFU/g~1100 CFU/g[2]。

四、质控样品要求

实验需包含以下质控环节：
1. 阳性对照：使用副溶血性弧菌标准菌株（如ATCC 17802）验证培养基和试剂有效性。
2. 阴性对照：采用无菌生理盐水或非目标菌（如大肠埃希氏菌）确保检测特异性。
3. 空白对照：全程实验需设置无菌操作空白[2]。

五、关键实验步骤

1. 样品处理：无菌称取25g样品加入225mL碱性蛋白胨水，均质后作为原液。
2. 增菌培养：36℃±1℃培养8-18小时，观察混浊度。
3. 分离培养：接种TCBS琼脂或显色培养基，36℃±1℃培养18-24小时，挑选典型菌落（蓝绿色或紫色）。
4. 生化鉴定：包括3%NaCl/7%NaCl/10%NaCl耐受试验、赖氨酸脱羧酶试验、O/F试验等11项生化反应。
5. 结果判定：符合革兰氏阴性、氧化酶阳性、发酵葡萄糖产酸不产气等特征[2]。

六、特别说明

1. 本标准已被SN/T 0173-2018替代，建议优先采用最新版本；
2. 实验操作需符合GB 19489《实验室生物安全通用要求》，对可疑致病菌株需在生物安全二级（BSL-2）环境下处理；
3. 对于环境样品检测，需根据实际污染风险调整采样量和检测灵敏度[2]。

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