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副溶血性弧菌成套生化鉴定管（HRGB）/用于副溶血性弧菌的生化鉴定

SHBG02-1

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10种*2套/盒*5盒

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副溶血性弧菌成套生化鉴定管（HRGB）介绍：

用途：用于副溶血性弧菌的生化鉴定。

添加剂：需配套添加1盒HB8281 V-P试剂盒使用。

使用说明：

1.实验准备：

从包装盒中取出安瓿瓶，用砂轮在瓶颈上划一圈，朝易折点（瓶颈上方蓝点），反方向用力折开安瓿瓶，插入安瓿瓶试管架中。如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。

2.接种方法：

从选择性琼脂平板(TCBS琼脂或弧菌显色培养基)上至少选取3个典型菌落或可疑菌落，划线接种到3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板进行纯化培养(36±1℃培养18-24h)，取纯化菌落做氧化酶试验和接种3%氯化钠三糖铁琼脂、嗜盐性试验、3%氯化钠甘露醇、3%氯化钠赖氨酸脱羧酶、3%氯化钠氨基酸脱羧酶对照、3%氯化钠V-P半固体和3%氯化钠ONPG。本成套生化鉴定管不含3%氯化钠三糖铁琼脂。请参照GB/T4789.7标准判断结果。

直接接种：用接种针从平板上挑取已纯化培养的同一菌落接种于需要试验的生化管中。

菌悬液法：

取一内盛2ml无菌水或无菌生理盐水试管，用接种针从纯化培养的平板上挑取单个菌落至无菌水中仔细研磨制成0.5麦氏浊度的均一细菌悬液，滴入需要试验的试管中，每管3滴。其中固体和半固体生化管采用穿剌接种。

3.接种完后放36℃±1℃培养。（用封口膜封口，封口膜应用75%酒精擦拭灭菌，成套生化管中附带有）

每盒包括：

无盐胰胨水2支、6%氯化钠胰胨水2支、10%氯化钠胰胨水2支、8%氯化钠胰胨水2支，3%氯化钠VP半固体培养基2支、3%氯化钠甘露醇2支、3%氯化钠赖氨酸脱羧酶2支、3%氯化钠氨基酸脱羧酶对照2支、氧化酶试纸1包、3%NaCl ONPG 2支共10种生化鉴定管并含无菌液体石蜡1支。

需滴加试剂明细表

副溶血性弧菌成套生化鉴定管（新国标）质量控制：

按使用说明进行操作，接种后置36±1℃培养。（用封口膜封口，封口膜应用75%酒精擦拭灭菌，成套生化管中附带有）

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

标准名称及标准号

GB/T 4789.7-2021 食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验

适用范围

适用于食品、环境样品及临床样本中副溶血性弧菌的分离、鉴定与生化特性分析，包括定性检测和定量检测。

核心检测方法

1. 分离培养：使用硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂（TCBS）选择性培养基进行初步分离。
2. 生化鉴定：通过氧化酶试验、嗜盐性试验、糖发酵试验（如葡萄糖、蔗糖）等成套生化反应管进行鉴定。
3. 血清学试验：必要时通过特异性抗血清进行分型验证。

检出限与定量限

1. 定性检测：样本中副溶血性弧菌的最低检出限为1 CFU/25g（或mL）。
2. 定量检测：通过平板计数法，检测限为10 CFU/g（或mL）。

质控样品要求

1. 阳性对照：使用标准菌株（如ATCC 33847）验证生化反应及培养基有效性。
2. 阴性对照：使用非目标菌（如大肠埃希氏菌）确保特异性。
3. 培养基质控：每批次需检测无菌性及促生长能力。

关键实验步骤

1. 样本前处理：25g样品与225mL碱性蛋白胨水均质后增菌培养（37℃, 8-12h）。
2. 选择性分离：划线接种TCBS平板（37℃, 18-24h），观察典型菌落（蓝绿色、直径2-3mm）。
3. 生化试验：挑取可疑菌落接种生化鉴定管，观察反应结果（如氧化酶阳性、3% NaCl生长）。

特别说明

1. 生物安全：实验操作需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行。
2. 结果判读：生化反应需在18-24h内完成，避免假阳性/阴性。
3. 血清分型：仅对临床或溯源需求样本进行，常规检测可不包含。

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