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MUG培养基/用于大肠杆菌测定(中国药典)_
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MUG培养基/用于大肠杆菌测定(中国药典)

HB5213 MUG Medium {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 100g {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 见证书 {{inventory}}
MUG培养基介绍:

用途:用于大肠杆菌测试(中国药典)。

成分(g/L)

蛋白胨10.0
磷酸二氢钾0.9
磷酸氢二钠6.2
硫酸锰0.0005
亚硫酸钠0.04
去氧胆酸钠1.0
硫酸镁0.1
氯化钠5.0
氯化钙0.05
MUG0.075
硫酸锌0.0005
pH值7.3±0.125℃

检验原理:

蛋白胨提供碳氮源;硫酸锰、硫酸镁、氯化钠和氯化钙提供各种离子可维持均衡的渗透压及利于目标菌的生长;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠为缓冲剂;亚硫酸钠和去氧胆酸钠为选择性抑菌剂。细菌的葡萄糖醛酸苷酶在碱性条件下,作用于4-甲基伞形酮-β-D 葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-DGlucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366nm 紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。

用法:

称取本品23.37g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,每管5ml,115℃高压灭菌20分钟,备用。

注:培养基中含少量硫酸镁、氯化钙,灭菌后可能出现微量沉淀

MUG培养基中细菌的生长特征:

MUG培养基的微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置30-35℃需氧培养5-24小时。

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国家标准解读:中国药典(2020年版)四部 通则1106 大肠埃希菌检查法
标准名称及标准号 中国药典(2020年版)四部 通则1106
《控制菌检查法》大肠埃希菌检查项
适用范围 适用于药品、原料、辅料及医疗器具中大肠埃希菌的定性检测,要求样品在需氧条件下培养后不得检出该菌
核心检测方法 采用酶底物显色法:大肠埃希菌产生的β-葡萄糖醛酸酶分解MUG(4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷),在366nm紫外光下产生荧光,同时结合选择性培养基抑制杂菌生长
检出限与定量限 定性检测方法,检出限为1 CFU/10g(以样品最低稀释级计),未设置定量限。阳性对照需在24小时内显示荧光反应
质控样品要求 1. 阳性对照:大肠埃希菌CMCC(B)44102菌株
2. 阴性对照:培养基无菌性对照及金黄色葡萄球菌抑制试验
3. 方法验证:需定期进行培养基促生长能力测试
关键实验步骤 1. 样品预处理:非无菌液体样品直接接种,固体样品需制成1:10供试液
2. 选择性增菌:接种于含胆盐的乳糖培养基,36℃培养18-24小时
3. 荧光反应观察:取增菌液接种MUG培养基,培养24小时后在暗室用366nm紫外灯观察荧光
4. 确证试验:荧光阳性样品需进行革兰氏染色和IMViC生化鉴定
特别说明 1. 含抑菌成分样品需用中和剂或薄膜过滤法处理
2. 荧光观察需在暗室进行,培养时间不得超过24小时以防假阳性
3. 部分菌株(如部分志贺氏菌)可能产生弱荧光,需通过靛基质试验排除
4. 培养基pH值需控制在7.2±0.2,超出范围可能导致假阴性

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