内标/甲醇中维生素B12-[13C7]/GB 5009.285-2022
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内标/甲醇中维生素B12-[13C7]/GB 5009.285-2022
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标准名称及标准号
标准名称:食品安全国家标准 食品中维生素B₁₂的测定
标准号:GB 5009.285-2022
相关CAS号:68-19-9(未标记维生素B₁₂)、13C7标记维生素B₁₂(作为内标)
适用范围
适用于食品(包括乳制品、婴幼儿配方食品、保健食品等)中维生素B₁₂的定量检测,检测方法基于液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),需使用同位素内标(如维生素B₁₂-[13C7])进行校准。
核心检测方法
方法原理:样品经前处理后,采用液相色谱分离目标物,通过质谱检测器进行定量分析。内标法用于校正基质效应和回收率偏差。
仪器要求:LC-MS/MS需满足质量分辨率、灵敏度及稳定性要求,色谱柱推荐C18或等效类型。
检出限与定量限
检出限(LOD):0.05 μg/100g(以样品基质计)
定量限(LOQ):0.15 μg/100g(需满足回收率70%-120%,RSD≤15%)
质控样品要求
空白加标:每批次样品需包含空白基质加标(加标浓度为LOQ水平),回收率需符合要求。
平行样:至少10%样品需做平行测定,相对偏差≤15%。
内标稳定性:内标响应值波动需控制在±20%以内。
关键实验步骤
样品前处理:均质后加入内标溶液,经酶解(α-淀粉酶或蛋白酶)、离心、净化(SPE柱或过滤)等步骤。
仪器条件:流动相为甲醇-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;质谱采用多反应监测(MRM)模式,定量离子对为维生素B₁₂及其同位素内标的特征碎片。
特别说明
1. 需严格避光操作,避免维生素B₁₂光解。
2. 同位素内标需与目标物同步进行前处理,以校正提取效率差异。
3. 基质复杂样品需优化净化步骤,避免干扰物影响定量准确性。
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