乳粉中维生素B6、维生素B12分析质控样品（GB 5009.154-2023/GB 5009.285-2022）
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批次号：G033177
含量：维生素B6 0.70±0.15 mg/100g 维生素B12 4.35.0±0.93μg/100g
规格：40g/瓶
生产日期：2025/6/24
有效期：2027/6/23
适用国标：GB 5009.154-2023 食品安全国家标准 食品中维生素B6的测定/GB 5009.285-2022 食品安全国家标准 食品中维生素B12的测定
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1. 样品经酸性水解释放结合态维生素B₆
2. 酶解处理释放糖基化形式
3. 反相C18色谱柱分离
4. 荧光检测器检测（激发波长293nm，发射波长395nm）
• 检出限(LOD)：0.005 mg/100g
• 定量限(LOQ)：0.015 mg/100g
2. 使用有证标准物质（CRM）作为质控样
3. 质控样浓度应覆盖待测样品浓度范围
4. 重复检测次数≥3次
5. 回收率要求：85%-110%
2. pH调节：冷却后NaOH调至pH4.0-4.5
3. 酶解处理：加入酸性磷酸酶，37℃水浴12h
4. 净化：经0.22μm滤膜过滤
5. 色谱条件：流动相甲醇-磷酸盐缓冲液(pH2.5)，流速1.0mL/min
2. 水解过程需严格控制温度和时间防止降解
3. 乳粉基质需特别注意脂肪干扰，必要时增加净化步骤
4. 方法验证需满足CNAS-CL01:2018要求
微生物法要点：
• 莱士曼氏乳酸杆菌（ATCC 7830）作为测试菌
• 样品经121℃、15min水解释放维生素B₁₂
LC-MS/MS要点：
• C18色谱柱分离
• 电喷雾正离子模式(ESI+)
• 多反应监测(MRM)模式检测
• 检出限(LOD)：0.02 μg/100g
• 定量限(LOQ)：0.05 μg/100g
2. 微生物法需同步测定标准曲线和质控样
3. 质控样浓度应包括高中低三个水平
4. 精密度要求：RSD≤10%
5. 使用标准菌株定期验证微生物活性
1. 样品处理：磷酸盐缓冲液(pH4.5)提取
2. 灭菌：121℃高压灭菌15min
3. 培养：接种菌悬液，36℃培养16-24h
4. 测定：分光光度法测600nm吸光度
LC-MS/MS法：
1. 提取：含0.1%甲酸的乙腈-水溶液
2. 净化：固相萃取柱净化
3. 色谱条件：0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱
2. 乳粉样品需注意基质效应对LC-MS/MS检测的影响
3. 两种方法具有等效性，实验室需进行方法学验证
4. 当检测结果接近限量值时，优先选用LC-MS/MS法
5. 标准溶液需避光保存于棕色瓶中
以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！