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维生素B12测定用培养基(GB5009.285-2022)/用于婴儿食品和乳粉中维生素B12测定_
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维生素B12测定用培养基(GB5009.285-2022)/用于婴儿食品和乳粉中维生素B12测定

HB7041-2 Vitamin B12 Assay Broth {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 250g {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 见证书 {{inventory}}

维生素B12测定用培养基(GB5009.285-2022)介绍:
用途:用于婴儿食品和乳粉中维生素B12测定。

成分(mg/L)

无维生素酸水解酪蛋白15000
葡萄糖40000
乙酸钠20000
DL-色氨酸400
L-胱氨酸400
硫酸腺嘌呤20
鸟嘌呤20
尿嘧啶20
黄嘌呤20
盐酸硫胺素1
核黄素1
烟酸2
泛酸钙1
盐酸吡哆醇4
p-氨基苯甲酸2
生物素0.01
叶酸0.2
吐温802000
磷酸氢二钾1000
磷酸二氢钾1000
硫酸镁400
氯化钠20
硫酸亚铁20
硫酸锰20
天冬门酰胺200
抗坏血酸4000
盐酸吡哆醛4
盐酸吡哆胺0.8
pH6.8±0.125℃
用法

称取本品8.5g,加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中,煮沸2-3分钟,分装试管,每管5ml(平均分配沉淀物),加入标品或测试样品,用蒸馏水补体积至10ml, 121℃高压灭菌5分钟,备用。

注:培养基中含多种维生素类成分,灭菌后有沉淀,分装时需搅拌均匀。

维生素B12测定用培养基微生物质控结果:

维生素B12测定用培养基微生物灵敏度试验: 

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36℃需氧培养22小时。

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产品货号产品名称产品规格产品说明及用途
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商城编码 产品名称 标准值 规格 CAS号 有效期 库存 标准价 数量 操作
100μg/mL
1mL
68-19-9
2026-06-24
≥10
168
4.60 μg/100g
40g
2026-01-18
3
800
0.1μg/mL
1mL
68-19-9(Unlabeled)13C7
2026-12-02
2
7000
95.6%
100mg
68-19-9
2027-09-17
6
410
**
20g
0
800
见证书
20g
0
900
100µg/mL
1mL
68-19-9
0
136
1µg/mL
1mL
68-19-9(Unlabeled)13C7
0
29800

一、适用范围

该标准适用于以下食品基质:
第一法(液相色谱法):婴幼儿食品、乳及乳制品、肉及肉制品。
第二法(液相色谱-质谱法):婴幼儿食品、乳及乳制品、肉及肉制品、即食谷物、烘焙食品、果冻、饮料。
第三法(微生物法):婴幼儿食品、乳及乳制品[1][5]。

二、核心检测方法

第一法(液相色谱法):试样经酶解后,使用氰化钾(或氰化钠)将钴胺素异构体转化为氧钴胺素,免疫亲和柱净化后,反相液相色谱分离,紫外检测器定量[1][2]。
第二法(液相色谱-质谱法):结合色谱分离与质谱检测,适用于复杂基质的高灵敏度分析[1][5]。
第三法(微生物法):基于微生物生长依赖维生素B12的原理进行定量,操作步骤与传统微生物法一致[5]。

三、检出限与定量限

具体数值需参考标准原文,但标准中明确:
• 液相色谱法的标准系列工作溶液浓度范围为30~200 ng/mL,提示其定量限较低[1]。
• 液相色谱-质谱法因高灵敏度适用于痕量检测(如饮料等低含量基质)[2][5]。

四、质控样品要求

质控样品需满足:
• 基质与待测样品一致(如乳制品需使用乳基质的质控样)。
• 标准系列溶液需临用现配,确保浓度准确性[1][3]。

五、关键实验步骤

1. 样品前处理:酶解释放维生素B12,氰化物转化异构体为氧钴胺素[1][2]。
2. 净化与富集:使用免疫亲和柱去除杂质并浓缩目标物(柱容量≥800 ng)[1][3]。
3. 仪器分析:反相色谱柱分离,紫外或质谱检测,外标法定量[1][5]。

六、特别说明

氰化物的作用:统一不同钴胺素异构体的检测形式,确保方法特异性[2]。
方法选择依据:高灵敏度基质(如果冻、饮料)优先选择第二法;乳制品等常规基质可选第一法或第三法[1][5]。
安全性:氰化物为剧毒试剂,实验需严格防护[2]。

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