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DNA酶甲基绿琼脂基础/用于弯曲杆菌的DNA酶水解试验（GB标准）

HB0247

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100g

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DNA酶甲基绿琼脂基础介绍：

用途：用于弯曲杆菌的DNA酶水解试验（GB标准）。

成分(g/L)

DNA	2.0
植物蛋白胨	5.0
胰酪蛋白胨	15.0
氯化钠	5.0
琼脂	15.0
pH值7.3±0.1	25℃

用法：

称取本品42.0g，徐徐加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，冷至50℃左右时，每100ml培养基中加入过滤除菌的0.5% 甲基绿水溶液 1ml，混匀，倾注平板。

甲基绿配制 (MG)：

配制 0.5%甲基绿水溶液。用等体积氯仿作5-7次抽提，直到氯仿层无色为止。过滤除菌保存。每100ml灭菌溶化的本培养基加入1ml（MG)染色液，甲基绿最终浓度为 0.005%。

DNA酶甲基绿琼脂基础微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养72-120小时。

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GB 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂

适用范围	适用于食品微生物检验中培养基的配制与质控，包含DNA酶甲基绿琼脂的制备要求[6][9]

核心检测方法

基于甲基绿-DNA复合物显色原理，通过观察菌落周围透明圈判断DNA酶活性[1][6]

检出限与定量限

可检测≥10⁴ CFU/g的弯曲杆菌，定量限需配合菌落计数法确认[8]

质控样品要求

需同时接种阳性对照菌株（如空肠弯曲菌）和阴性对照菌株[9]

关键实验步骤

甲基绿需经5-7次氯仿纯化，培养基高压灭菌后添加0.005%甲基绿溶液[1][6]

特别说明	培养基pH需严格控制在7.3±0.2，高压灭菌后需48小时内使用[1][6]

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