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甲苯胺蓝-DNA酶琼脂/用于DNA酶试验

HB8299

Toluidine Blue DNA Agar

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100g

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甲苯胺蓝-DNA酶琼脂介绍：

用途：用于DNA酶试验。

成分（g/L）

DNA	0.3
氯化钙	1.1
氯化钠	10.0
三羟甲基氨基甲烷(Tris)	6.1
甲苯胺蓝	0.083
琼脂	10.0
pH值9.0±0.1	25℃

检验原理：具有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA)，使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链，使指示剂甲苯胺蓝作用变成粉红色；氯化钙提供阳离子作为激活剂；氯化钠维持均衡的渗透压；三羟甲基氨基甲烷为缓冲剂；琼脂为培养基的凝固剂。

用法：

称取本品27.58g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶。如立即使用可不需灭菌。如不立即使用，121℃高压灭菌15分钟。已灭菌的培养基在室温可存放4个月无变化，并经数次熔化后仍可用。

注：培养基含少量氯化钙，灭菌后可能出现微量沉淀。

甲苯胺蓝－DNA酶琼脂微生物结果：


a：金黄色葡萄球菌ATCC6538，b：金黄色葡萄球菌ATCC25923，c：大肠埃希氏菌ATCC25922

甲苯胺蓝－DNA酶琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置35℃需氧培养4小时。

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国家标准与行业标准解读

适用范围	用于金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶检测及选择性分离培养，适用于食品微生物检验和临床病原菌鉴定[6]。

核心检测方法

基于耐热核酸酶分解DNA的原理，通过甲苯胺蓝显色反应（粉红色环）判定结果，需配合载玻片培养法进行菌落验证[3][6]。

检出限与定量限

可检测≥10² CFU/mL的金黄色葡萄球菌，定量限需结合7.5%氯化钠肉汤增菌培养后测定[6]。

质控样品要求

需使用标准菌株（如ATCC 25923）进行阳性对照，阴性对照采用非产酶葡萄球菌；培养基pH需严格控制在9.0±0.2[3][6]。

关键实验步骤

1. 100℃沸水处理菌悬液15分钟
2. 取0.01mL处理液接种载玻片琼脂孔
3. 35℃培养4小时后观察显色反应[3][4]

特别说明	需与Baird-Parker琼脂联合使用以提高特异性；显色反应需在4小时内判读，避免假阳性[3][6]。

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