DNA酶琼脂/用于细菌DNA酶检测
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用途：用于细菌DNA酶检测。
成分(g/L)
检验原理：
胰蛋白胨和大豆胨提供碳源和氮源；有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA)，使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链；氯化钙提供阳离子作为激活剂；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。将盐酸滴在培养基表面，如DNA酶阳性，其菌落周围可以产生明显透明环，如DNA酶阴性，盐酸与完整的脱氧核糖核酸反应，可形成浑浊的沉淀；如果加入0.1%甲苯胺蓝溶液，甲苯胺蓝为指示剂，DNA酶阳性时，水解DNA部分为蔷薇色；DNA酶阴性时，甲苯胺蓝显蓝色。
用法：
称取本品42.0g，缓缓加热溶解于1000ml蒸馏水中（避免形成不溶性丝状物），116℃高压灭菌15分钟，冷至50℃左右时，倾入无菌平皿。将平板培养基分成4-8区，每区用接种环划线肉汤培养物，37℃培养18-24小时，在培养基表面滴加 1mol/L盐酸，若为DNA酶阳性，在生长菌落周围产生明显透明环。如果加入0.1%甲苯胺蓝溶液，残留DNA部分变蓝，其水解部分变为蔷薇色。
注：培养基含少量氯化钙，灭菌后可能出现微量沉淀。
DNA酶琼脂上细菌菌落特征：
DNA酶琼脂
金黄色葡萄球菌ATCC25923
DNA酶琼脂
金黄色葡萄球菌ATCC6538
DNA酶琼脂微生物灵敏度试验：
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置37±1℃需氧培养18-24小时。
以上信息仅供参考，请以实物批次为准！
本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。
1. 配制含0.005%甲基绿的DNA琼脂培养基，pH 7.3±0.2
2. 待测菌株划线接种于平板上，37℃培养18-24小时
3. 直接观察菌落周围是否出现透明环或培养基褪色区[7][9]
2. 半定量判定：透明环直径与菌落直径比值≥1.5为强阳性反应
2. 阴性对照：表皮葡萄球菌ATCC 14990（无透明环）
3. 培养基质控：未接种平板应保持均匀蓝绿色，无自发褪色
2. 培养基灭菌：121℃高压15分钟，冷却至50℃加入染料
3. 接种要求：单个菌落划线，避免过度生长影响观察
4. 结果判读：培养后无需酸处理，直接肉眼观察[7][9]
2. 培养基中DNA含量需严格控制在2.0g/L±0.2g/L
3. 变形杆菌属可能出现假阳性，需结合其他生化试验
4. 培养时间超过24小时可能导致褪色扩散干扰判定
以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！