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绿脓菌素测定用假单胞菌琼脂培养基（PAP）/用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验

HB5187-5

Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin

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250g

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绿脓菌素测定用假单胞菌琼脂培养基（PAP）介绍：

用途：用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验。

用法：称取本品46.4g，另称取10g甘油，溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。

注：培养基中含少量氯化镁，灭菌后可能出现微量沉淀。

绿脓菌素生成试验方法及原理：

方法：挑取可疑菌落接种在在绿脓菌素测定用培养基（PDP）斜面上，培养24小时，观察斜面有无色素。如有色素，在试管内加氯仿3.0～5.0mL，充分震摇，使培养物中的绿脓菌素提取在氯仿中，待氯仿提取液呈现绿色时，加1mol/L盐酸约1mL，震摇后静置片刻，上层盐酸溶液中呈现粉红至红色实验结果为阳性，否则为阴性。

原理：铜绿假单胞菌能产生的绿脓菌素能被氯仿提取，且在水中溶解度比氯仿大，并且会发生可逆的氧化还原反应，氧化时碱性呈蓝色，酸性呈红色。所以加入盐酸溶液并震摇后，绿脓菌素会由氯仿转移至盐酸溶液中，并在酸性环境中呈红色。

绿脓菌素测定用假单胞菌琼脂培养基中细菌的生长特征：

绿脓菌素测定用假单胞菌琼脂培养基（PAP）微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24±2小时。

绿脓菌素测定用假单胞菌琼脂培养基（PAP）相关产品：

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围
• 适用于绿脓杆菌（铜绿假单胞菌）的绿脓菌素特异性检测，主要用于药品、医疗器械、化妆品及食品等领域的微生物安全控制[2][5][6][10]

二、核心检测方法
• 基于菌株在PAP培养基上的代谢特性，通过观察菌落色素（绿色/黄绿色）及氯仿抽提液显色反应进行判定[6][10]

三、检出限与定量限
• 最低检出限：1 CFU/g（按GB标准增菌后划线培养法）[5][6]

四、质控样品要求
• 阳性对照：铜绿假单胞菌CMCC10104株，需显示典型绿色色素反应
• 阴性对照：大肠杆菌等非目标菌，应无色素产生[6][10]

五、关键实验步骤
1. 培养基配制：45.4g干粉+1L水+10g甘油，115℃灭菌20分钟[6]
2. 样品处理：按GB标准进行增菌培养后划线接种
3. 培养条件：30-35℃培养24小时观察结果[5][6]

六、特别说明
• 培养基pH需严格控制在7.3±0.1，氯化镁和硫酸钾为关键显色诱导成分
• 检测结果需结合菌落形态、生化试验及血清学方法综合判定[2][6][10]

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