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乙酰胺琼脂/用于绿脓杆菌的选择性分离培养（GB标准）

HB5183

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250g

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乙酰胺琼脂介绍：

用途：用于绿脓杆菌的选择性分离培养（GB标准）。

成分(g/L)

乙酰胺	10.0
氯化钠	5.0
磷酸氢二钾	1.39
磷酸二氢钾	0.73
硫酸镁	0.5
酚红	0.012
琼脂	20.0
pH值7.2±0.1	25℃

检验原理：具有乙酰胺酶的细菌能利用乙酰胺作为碳源，并分解乙酰胺产碱；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钾和磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供生长必要的离子；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH 指示剂。

用法：

称取本品37.6g，加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。

注：培养基中含硫酸镁、乙酰胺，灭菌后有少量沉淀。

乙酰胺琼脂上铜绿假单胞菌和荧光假单胞菌的生长特征：

铜绿假单胞菌生长利用乙酰胺产生碱性代谢产物，使得培养基颜色变为玫红色，

荧光假单胞菌36℃不生长，于25℃培养生长良好且未产生碱性物质则培养基不变色

乙酰胺琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24±2小时。

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GB 7918.4-87 乙酰胺琼脂检测标准解读

适用范围

适用于化妆品及卫生用品中绿脓杆菌的选择性分离培养，特别针对具有乙酰胺酶活性的目标菌株[5]。

核心检测方法

采用选择性培养基法，通过乙酰胺酶特异性分解底物产生碱性代谢物，结合酚红指示剂显色反应进行菌落筛选。氯化钠维持渗透压，硫酸镁提供必需离子[5]。

检出限与定量限

最低检出限为10 CFU/g样品，定量范围10²-10⁶ CFU/g，需通过梯度稀释法确认菌落计数有效性[5]。

质控样品要求

每批次检测需同步进行阳性对照（ATCC 27853）和阴性对照（大肠杆菌ATCC 25922），培养18-24小时后观察典型菌落生长情况[5][7]。

关键实验步骤

1. 培养基制备：称取31g干粉溶解于1000ml蒸馏水，121℃灭菌20分钟
2. 样品处理：1:10稀释后37℃预增菌6小时
3. 划线接种：使用三区划线法分离单个菌落
4. 培养观察：36±1℃培养18-24小时，记录蓝绿色菌落数量[5]。

特别说明

1. 培养基pH值严格控制在7.2±0.1范围
2. 含结晶紫培养基需避光保存
3. 铜绿假单胞菌需进一步做氧化酶试验和42℃生长验证
4. 失效培养基会出现异常颜色沉淀[5][7]。

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