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双料乳糖胆盐（含中和剂）培养基/用于化妆品中粪大肠菌群的测定（GB标准）

HB8593

Double Lactose Bile Medium

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250g

hopebio

见证书

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乳糖
BW5482A-2g | ≥98%

双料乳糖胆盐（含中和剂）培养基介绍：

用途:用于化妆品中粪大肠菌群的检验。

成分(g/L)：

蛋白胨	40.0
猪胆盐	10.0
乳糖	10.0
溴甲酚紫	0.02
卵磷脂	2.0
吐温80	14.0
pH值 7.4±0.1	25℃

检验原理蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求；猪胆盐可抑制革兰氏阳性细菌的生长；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；卵磷脂和吐温80 能中和化妆品中的防腐剂，并能起到乳浊液中分散物质的功能；溴甲酚紫是pH 指示剂，酸性呈黄色，碱性呈紫色。

用法

称取本品 76.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装试管(每支试管中加入一个小倒管),115℃高压灭菌20 分钟,备用。

双料乳糖胆盐管(含中和剂)中大肠埃希氏菌产酸产气，弗氏柠檬酸盐杆菌产酸不产气，

鼠伤寒沙门氏菌不产酸不产气，金黄色葡萄球菌被抑制。

双料乳糖胆盐(含中和剂)培养基原理和使用方法:

双料乳糖胆盐（含中和剂）培养基微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置44±0.5℃需氧培养24-48小时。

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一、适用范围

该培养基适用于化妆品中粪大肠菌群的检测，符合国家标准（GB标准）要求，主要用于样品的增菌培养及中和剂对抑菌成分的消除[1]。

二、核心检测方法

1. 样品处理：液体样品直接取10mL接种于双料培养基；固体样品需用生理盐水稀释后均质处理，再取10mL接种。
2. 培养条件：36±1℃需氧培养24±2小时，观察产酸产气现象以判定结果[2][5]。

三、检出限与定量限

根据GB标准要求，粪大肠菌群的检出限为1CFU/g或mL（具体依据样品类型和稀释倍数计算）。定量限需通过验证实验确定，通常与培养基灵敏度及样品预处理相关[1][2]。

四、质控样品要求

1. 阳性对照：使用标准菌株（如大肠埃希氏菌）验证培养基促生长能力。
2. 阴性对照：无菌生理盐水替代样品，确保培养基无交叉污染。
3. 中和剂验证：需确认中和剂能有效消除样品中抑菌成分[1][7]。

五、关键实验步骤

1. 培养基制备：按说明书称量、溶解并高压灭菌（121℃ 15分钟），避免反复加热。
2. 接种与培养：严格按样品类型控制接种量，培养期间避免震动干扰气体观察。
3. 结果判定：产气且pH下降（溴甲酚紫指示剂变黄）为阳性[2][5][8]。

六、特别说明

1. 中和剂作用：培养基中含中和剂（如吐温-80），用于消除化妆品中防腐剂的抑菌效应。
2. 双料与单料选择：接种量＞1mL时使用双料培养基，≤1mL时使用单料以避免过度稀释影响灵敏度[1][2][5]。

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