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改良Letheen琼脂基础（颗粒）/用于测定季铵化合物的细菌活性

HBKP8603-3-250

Modified Letheen Agar Base

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250g

hopebio

见证书

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改良Letheen琼脂基础（颗粒）介绍：

Modified Letheen Agar Base is used for the determination of bacterial activity of quaternary ammonium compounds.

Approximate Formula:

Ingredients	gm/liter
Peptone from Meat	10.0
Peptone from Casein	10.0
Meat Extract	3.0
Yeast Extract	2.0
Sodium Chlorid	5.0
D(+) Glucose	1.0
Lecithin	1.0
Sodium Bisulfite	0.1
Agar	20.0
Final pH7.2±0.2 at 25℃

*Adjusted and/or supplemented as required to meet performance criteria.

Directions:

Suspend 52.1g of the medium and 7 ml of Tween-80 in one liter of distilled water or deionized water. Mix well. Heat and boil for 1 minute with frequent agitation to completely dissolve the powder. Sterilize in an autoclave at 121℃(15 lbs.) for 15 minutes. Pour into petri dishes.

Principle and Interpretation:

Peptone, meat extract and yeast extract provide nitrogen source for the growth of microorganisms, vitamin and growth factor. Sodium chloride provides a suitable osmotic environment. Glucose is a fermentable sugar. Lecithin can neutralize quaternary ammonium salt, Tween-80 can neutralize phenol, hexachlorophenol, formalin, the combination of which can neutralize ethanol. Sodium bisulfite partially neutralize the preservative systems commonly found in cosmetics. Agar is the solidifying agent of the medium.

Appearance:

Dehydrated medium is a free-flowing yellowish granule. The prepared medium is a kind of yellowish transparent gel.

Precautions:

This medium is for laboratory use only. Dried medium which is past shelf life, caking or color variation cannot be used.

Storage conditions and Shelf life:

Modified Letheen Agar Base must be stored tightly capped in the original container at 5-30°C. The dehydrated medium has a shelf life of 3 years from date of manufacturing. Prepared medium may be stored, out of direct light at 2-8°C.

Quality control:

Prepare the culture medium as per label directions. Inoculate and incubate at 36±1℃ for 24 hours.

Microorganism	Strains Number	Inoculum (CFU)	Growth	Recovery
Staphylococcus aureus	ATCC 6538	10-100	Luxuriant	≥70%
Pseudomonas aeruginosa	ATCC 9027	10-100	Luxuriant	≥70%
Escherichia coli	ATCC 25922	10-100	Luxuriant	≥70%
Salmonella typhimurium	ATCC 14028	10-100	Luxuriant	≥70%

References:1. FDA Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th ed. (1995), chapter 23:Microbiological Methods for Cosmetics, Letheen Agar (modified) = M 78,etheen Broth (modified) = M 79.

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国家标准解读：消毒剂季铵盐类活性检测方法

标准名称及标准号

GB/T 26366-2010《季铵盐类消毒剂卫生要求》

适用范围	适用于单链季铵盐（如苯扎氯铵、苯扎溴铵）及复合季铵盐类消毒剂的杀菌活性评价，涵盖液体、凝胶及载体消毒产品。

核心检测方法

悬液定量杀菌试验法：以改良Letheen琼脂为中和剂基质，通过稀释中和法测定消毒剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等指示菌的杀灭率（≥99.999%为合格）。

检出限与定量限

细菌培养法检出限为1 CFU/mL，定量检测下限为5×10² CFU/mL，试验组菌落数应≤5 CFU/样本，对照组≥1×10⁵ CFU/mL。

质控样品要求

1. 阳性对照：含菌量≥5×10⁵ CFU/mL的菌悬液
2. 阴性对照：无菌PBS溶液
3. 中和剂验证：需证明中和剂可完全中和消毒剂且不影响细菌复苏

关键实验步骤

1. 中和剂选择：使用含3%吐温80和0.3%卵磷脂的Letheen肉汤
2. 作用时间：根据产品说明设定（通常5-30分钟）
3. 培养条件：37℃培养48小时，需氧环境
4. 结果判定：试验重复3次，每次样本数≥5个

特别说明	1. 有机物干扰试验：需添加3%牛血清白蛋白模拟实际使用环境 2. 温度敏感性：季铵盐类消毒剂活性受水温影响显著，需在20±1℃恒温水浴操作 3. 中和剂毒性测试：需单独验证中和剂对试验菌株无抑制作用

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