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标准物质/维生素M(叶酸，维生素Bc)/GB 5009.211-2022_59-30-3
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标准物质/维生素M(叶酸，维生素Bc)/GB 5009.211-2022

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维生素B1 0.80±0.16 mg/100g 维生素B2 1.60±0.50 mg/100g 维生素B6 0.70±0.15 mg/100g 维生素B12 4.35±0.93μg/100g 叶酸 167±30 μg/100g 生物素24.5±5.1 μg/100g
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叶酸 167±35 μg/100g 生物素24±5 μg/100g
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叶酸167±30 μg/100g
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标准名称及标准号
GB 5009.211-2022《食品安全国家标准 食品中叶酸的测定》
适用范围
本标准适用于食品（包括婴幼儿配方食品、乳制品、谷物等）中叶酸（维生素M，CAS:59-30-3）的测定，涵盖天然叶酸和合成叶酸形式。
核心检测方法
采用高效液相色谱法（HPLC）或液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）。样品经酶解、提取、净化后上机分析，通过保留时间与标准品比对定性，外标法定量。
检出限与定量限
HPLC法检出限（LOD）为0.5 μg/100g，定量限（LOQ）为1.5 μg/100g；LC-MS/MS法LOD为0.1 μg/100g，LOQ为0.3 μg/100g。
质控样品要求
每批次样品需同步进行空白试验、加标回收试验（加标量应为样品中叶酸含量的50%-150%），加标回收率应控制在85%-115%，相对标准偏差（RSD）≤10%。
关键实验步骤
1. 样品前处理：加入磷酸盐缓冲液和蛋白酶进行酶解（37℃水浴2h）。
2. 提取与净化：离心后取上清液经0.45 μm滤膜过滤。
3. 色谱条件：C18色谱柱，流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液梯度洗脱，检测波长280 nm（HPLC）。
特别说明
1. 标准物质叶酸纯度应≥98%，储存条件为避光、-20℃以下。
2. 含复杂基质（如强化食品）需采用同位素内标法消除基质效应。
3. 方法不适用于含高浓度干扰物（如维生素C＞100 mg/100g）的样品。

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