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克罗诺杆菌显色培养基/用于婴儿配方奶粉和其他食品种克罗诺杆菌的快速检测

HB7012-8

Cronobacter Chromogenic Medium

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1000ml

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见证书

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克罗诺杆菌显色培养基介绍：

克罗诺杆菌显色培养基是青岛海博生物公司生产的培养基,用于婴儿配方奶粉和其它食品中克罗诺杆菌的快速检测。克罗诺杆菌显蓝 -绿色菌落,其它菌显无色或黄色。

用法：

称取本品6.48g加入200ml蒸馏水,加热煮沸完全溶解,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,倾入无菌平皿。

检验原理：

胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子；氯化钠维持渗透压；琼脂为凝固剂；脱氧胆酸钠主要抑制革兰氏阳性菌的生长，柠檬酸铁铵和硫代硫酸钠可使产硫化氢的非目标菌呈现黑色，阪崎克罗诺杆菌可特异性分解底物5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡糖甙使菌落显蓝-绿色，其他不产硫化氢、不分解底物的菌一般显无色或黄色。

操作步骤：

1、轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物,用10ul接种环挑取增菌液划线接种于克罗诺杆菌显色培养基平板,接种2个平板; 2、倒置放入培养箱36℃±1℃培养24h±2h,典型的克罗诺杆菌为蓝 - 绿色菌落; 3、挑取可疑菌落划线接种于TSA平板36℃±1℃培养24h±2h,做PCR鉴定或生化鉴定。

质量控制：

1、外观

此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色或乳白色。制备好的平板呈淡黄色固体培养基。

2、微生物试验

质控菌株	菌株编号	生长情况	菌落颜色
克罗诺杆菌	ATCC29544	+++	蓝-绿色
金黄色葡萄球菌	ATCC25923	-	-
沙门氏菌	ATCC14028	+++	无色，有黑色中心
大肠杆菌	ATCC25922	+++	淡黄色
普通变形杆菌	CMCC49027	+++	无色

典型特征：

典型的克罗诺杆菌为蓝 -绿色菌落,其它菌为无色、乳白色或黄色菌落。

贮存：

制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度 2-8℃,注意避光保存。

失效：

干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

注意：

此培养基仅供实验室使用。

克罗诺杆菌显色培养基相关产品：

产品货号	产品名称	产品规格	产品说明及用途
HB0177-8	胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）（参比培养基）TSA Agar	250g	一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养
HBPM0177-8	胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）平板（9cm）（参比培养基）TSA Agar	9cm*10	一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养
HB0177-25K	胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）（25kg）TSA Agar	25kg/桶	一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养，也可用于阪崎肠杆菌的纯化培养和产黄色素试验
HB4084	缓冲蛋白胨水（BPW）Buffered Peptone Water	250g	用于沙门氏菌前增菌培养，亦可用于李斯特氏菌前增菌培养（GB、SN标准）
HB0177	胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）TSA Agar	250g	一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养，也可用于阪崎肠杆菌的纯化培养和产黄色素试验
HB7012	克罗诺杆菌（阪崎肠杆菌）显色培养基Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium	1000ml	用于阪崎杆菌的显色培养，阪崎杆菌显蓝色，其它肠杆菌显无色
HB8297-1	脑心浸液肉汤(BHI)Brain Heart Infusion Broth	250g	营养丰富,用于培养各种细菌
HB0102-2	改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm）Modified lauryl sulfate tryptose vancomycin medium	250g	用于阪崎杆菌选择性增菌培养（GB标准）
HB0102-2a	万古霉素溶液Vancomycin Solution	1mg*5支	每支添加于100mlmLST-VM中
HB7012	克罗诺杆菌（阪崎肠杆菌）显色培养基Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium	1000ml	用于阪崎杆菌的显色培养，阪崎杆菌显蓝色，其它肠杆菌显无色
HB0176	VRBG琼脂VRBG Agar	250g	用于奶粉中阪崎杆菌的分离培养(FDA、SN方法)
HB0115	西蒙氏枸橼酸盐琼脂Simmons Citrate Medium	250g	用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)
SHBG11	阪崎肠杆菌成套生化鉴定管biochemical identification of sets of tubes	11种2套/盒5盒	用于阪崎杆菌的生化试验
HB2100	氧化酶试纸Oxidase Strips	10片	用于细菌的氧化酶试验
HB7012-4	阪崎肠杆菌分离琼脂（ESIATM）Enterobacter Sakazakii Isolation Agar	200g	用于阪崎肠杆菌分离培养
HB0177-5k	胰蛋白胨大豆琼脂TSA Agar	5kg/袋	一种通用培养基，用于各种微生物的培养
HB8900	克洛诺菌筛选肉汤基础（CSB增菌液）CronobacterScreening Broth Base	250g	用于克洛诺菌的选择性增菌培养
GB210	PNPG试剂4 Nitrophenyl(PNP)α-D-glucopyranoside	2ml*10支	用于克罗诺杆菌的快速鉴定
HBKP0177	胰蛋白胨大豆琼脂（颗粒）TSA Agar Granule	250g	一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养，也可用于阪崎肠杆菌的纯化培养和产黄色素试验

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

GB 4789.40-2024 适用于婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品、乳及乳制品及其原料中克罗诺杆菌的检验，明确规定了检测流程和判定标准[3][7]。

二、核心检测方法

1. 前增菌：使用缓冲蛋白胨水（BPW）进行样品预增菌；
2. 选择性增菌：采用改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（mLST-V）；
3. 分离培养：使用克罗诺杆菌显色培养基（DFI琼脂），目标菌落呈蓝绿色[4][7][10]。

三、检出限与定量限

检出限为1 CFU/100g(mL)，定量限为10 CFU/g(mL)，需通过梯度稀释和菌落计数确认[3][7]。

四、质控样品要求

1. 阳性对照：需使用标准菌株（如ATCC 29544）；
2. 阴性对照：培养基空白对照；
3. 样品处理：需无菌均质，避免交叉污染[3][7]。

五、关键实验步骤

1. 样品预处理：按1:10比例加入BPW缓冲液，均质后36℃±1℃培养18-24小时；
2. 选择性增菌：取1mL转种至mLST-V肉汤，41.5℃±1℃培养24小时；
3. 分离培养：划线接种显色培养基，36℃培养24-48小时观察蓝绿色菌落[3][4][7]。

六、特别说明

1. 显色培养基需避光保存，配制后2小时内使用；
2. 需结合生化鉴定（如氧化酶试验、糖发酵试验）或PCR方法确认；
3. 2016版标准新增PCR鉴定方法，2024版删除了产黄色素等冗余生化指标[7][10]。

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