改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm）/用于奶粉中坂崎肠杆菌检验时增菌培养（GB标准）_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm）/用于奶粉中坂崎肠杆菌检验时增菌培养（GB标准）

HB0102-2

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250g

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见证书

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改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm）介绍：

用途：用于奶粉中坂崎肠杆菌检验时增菌培养（GB标准）

添加剂：

每瓶需配套添加8盒HB0102-2a 万古霉素溶液使用；每100mL 改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm)中添加1支。

成分(g/L)

胰蛋白胨	20.0
氯化钠	34.0
乳糖	5.0
磷酸氢二钾	2.75
磷酸二氢钾	2.75
月桂基硫酸钠	0.1
pH值6.8±0.2	25℃

检验原理：

胨胰蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体细胞生长所需要的氮源、维生素、氨基酸及生长因子等；乳糖提供菌体细胞生长所需要的碳源；氯化钠维持体系渗透压平衡；磷酸盐为菌体生长提供相对稳定的酸碱缓冲体系；月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群类细菌的生长。克罗诺杆菌属具有较强的耐渗透压能力和较好的耐热性，且对万古霉素天然耐药，因此使用的改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨（mLST-Vm）肉汤在提供了良好营养的条件下利用高浓度的氯化钠和万古霉素，且在41.5℃±1℃培养，能有效的抑制革兰氏阳性菌和其他不耐渗透压、不耐热的细菌生长。

用法：

称取本品64.6g，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，分装每瓶100ml，121℃高压灭菌15分钟，冷至45-50℃时，加入过滤除菌的万古霉素(1mg/ml)溶液1支，分装至无菌试管中，每管10ml，混匀，备用。

不同细菌在改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm)上的不同反应：

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm)微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置44±0.5℃需氧培养24±2小时。

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GB 4789.40-2024 食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌检验

适用范围

本标准适用于婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品、乳及乳制品及其原料中克罗诺杆菌的检验。

核心检测方法

1. 增菌培养：使用改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm）进行选择性增菌；
2. 分离培养：通过显色培养基或PCR法鉴定目标菌；
3. 生化鉴定：利用全自动微生物生化鉴定系统确认菌种。

检出限与定量限

未明确标注具体数值，需根据实际样品基质通过方法验证确定。

质控样品要求

1. 阳性对照：使用标准菌株（如ATCC 29544）；
2. 阴性对照：无菌生理盐水或等效基质；
3. 培养基质量控制：每批次需验证促生长能力及选择性。

关键实验步骤

1. 样品预处理：25g样品与225mL缓冲蛋白胨水均质；
2. 增菌条件：36℃±1℃培养18-24小时；
3. 万古霉素添加：每10mL mLST肉汤加入0.1mL过滤除菌的万古霉素溶液（终浓度10μg/mL）。

特别说明

1. mLST-Vm需现配现用，配制后24小时内使用；
2. 万古霉素溶液需0℃-5℃避光保存且不超过15天；
3. 实验环境需符合二级生物安全实验室要求。

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