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HBI霍乱弧菌生化鉴定条(SN)/用于霍乱弧菌的生化鉴定(SN/T1022标准)_
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HBI霍乱弧菌生化鉴定条(SN)/用于霍乱弧菌的生化鉴定(SN/T1022标准)

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HBI霍乱弧菌生化鉴定条(SN)介绍:

    用于霍乱弧菌的生化鉴定。组成:MR-VP、ONPG、尿素酶、明胶、精氨酸双水解酶肉汤、鸟氨酸脱羧酶肉汤、赖氨酸脱羧酶肉汤、氨基酸脱羧酶对照、无盐胰胨水、3%氯化钠胰胨水、6%氯化钠胰胨水、8%氯化钠胰胨水、10%氯化钠胰胨水、1%氯化钠甘露醇、1%氯化钠乳糖、1%氯化钠纤维二糖、1%氯化钠阿拉伯糖、1%氯化钠蔗糖、1%氯化钠甘露糖、42℃生长试验,共20种生化反应。(SN标准)

添加剂:每盒鉴定条需配套1盒 HB8279 kovacas靛基质试剂盒1盒 GS070 无菌液体石蜡使用。

使用方法:

1.实验准备:

从包装盒中取出一条生化鉴定条,打开盖子,用打孔器开孔或直接把膜撕掉。如果染菌或变色,则不能使用,重新拿一条。注:打孔器用75%酒精擦拭后使用。

2.接种方法:

从选择性琼脂平板(TCBS琼脂或弧菌显色培养基)上至少选取5个典型菌落或可疑菌落,在氯化钠营养琼脂纯化培养,在显微镜下检验(革兰氏染色试验和动力试验)后分别接种到氯化钠三糖铁琼脂,并进行氧化酶试验。本生化鉴定条不含氯化钠三糖铁琼脂。其它的生化管是否进行接种,请参照SN/T1022标准。

菌悬液法:

取一内盛2ml无菌生理盐水试管,用接种针从分离纯化平板上挑取单个菌落至无菌生理盐水中仔细研磨制成0.5麦氏浓度的均一细菌悬液,每孔加入100ul菌悬液,其中固体和半固体生化管采用穿剌接种。鸟氨酸、精氨酸、赖氨酸和氨基酸对照需加灭菌石蜡覆盖液面。

3.接种完后做好标记,盖上盖子,放入底托中,放置36℃±1℃培养(42℃生长置42℃培养)。

4.培养结束后,放在记录卡上观察。

需滴加试剂明细表

HBI霍乱弧菌生化鉴定结果:

HBI霍乱弧菌生化鉴定条质量控制:

按使用说明进行操作,接种后置36±1℃培养(42℃生长置42℃培养)。

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一、适用范围
适用于食品卫生、水质检测及临床标本中霍乱弧菌的快速筛查与鉴定,覆盖微生物学、医学检验和公共卫生领域[2]
二、核心检测方法
1. 胶体金免疫层析法:通过双抗体夹心原理检测O1/O139群抗原,15分钟快速判读结果[4]
2. 分离培养法:采用TCBS选择性培养基进行菌株分离,配合生化反应鉴定[5][6]
三、检出限与定量限
胶体金法检测限:≥1×10⁶ CFU/mL(粪便标本)
培养法灵敏度:可检出1-10 CFU/g(需经增菌步骤)[4][6]
四、质控样品要求
每批次检测需包含:
• 阳性对照:O1/O139群标准菌株
• 阴性对照:大肠杆菌ATCC25922
• 空白对照:无菌PBS缓冲液[4][8]
五、关键实验步骤
1. 样本处理:取粪便标本1g加入碱性蛋白胨水增菌6-8小时[5]
2. 接种培养:划线接种TCBS培养基,35℃培养18-24小时[6]
3. 结果判读:观察黄色菌落(可疑菌)进行氧化酶试验和血清凝集[5]
六、特别说明
• 阳性结果需经省级CDC复核确认
• 操作人员需具备BSL-2实验室资质
• 疑似标本需高压灭菌(121℃ 30min)后处理[4][8]

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