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HBI肠杆菌科细菌生化鉴定条(GB)/用于肠杆菌科细菌的生化鉴定(GB4789.41标准)

HBIG08

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5条/盒

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见证书

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HBI肠杆菌科细菌生化鉴定条(GB)介绍：

用于肠杆菌科细菌的生化鉴定，包括半固体琼脂，鸟氨酸脱羧酶肉汤，赖氨酸脱羧酶肉汤，氨基酸脱羧酶对照，西蒙氏枸橼酸盐，硫化氢，蛋白胨水（色氨酸肉汤），MR-VP（2孔），苯丙氨酸，甘露醇，肌醇，山梨醇，蜜二糖，核糖醇（侧金盏花醇），棉子糖共16种生化反应。(GB标准)

添加剂：每盒鉴定条需配套

1盒 HB8281 V-P试剂盒

1盒 HB8280 甲基红指示剂

1盒 HB8279 kovacas靛基质试剂盒

1盒 GS070 无菌液体石蜡

1盒 GB095a 苯丙氨酸指示剂

使用方法：

1.实验准备：

从包装盒中取出一条生化鉴定条，打开盖子，用打孔器开孔或直接把膜撕掉。如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一条。注：打孔器用75%酒精擦拭后使用。

2.接种方法：

以接种针取试验培养物，分别接种到以下培养基：半固体琼脂，鸟氨酸脱羧酶肉汤，赖氨酸脱羧酶肉汤，氨基酸脱羧酶对照，西蒙氏枸橼酸盐，硫化氢，尿素酶，蛋白胨水（色氨酸肉汤），MR,VP，苯丙氨酸，甘露醇，肌醇，山梨醇，蜜二糖，核糖醇（侧金盏花醇），棉子糖。

悬液接种：

取一内盛2ml无菌生理盐水试管，用接种针从营养琼脂斜面挑取部分菌落至无菌生理盐水中仔细研磨制成均一细菌悬液，每孔加入100ul菌悬液,其中固体和半固体生化管采用穿剌接种。赖氨酸、鸟氨酸和氨基酸对照需加灭菌石蜡覆盖液面。

3.接种完后做好标记，盖上盖子，放入底托中，放置36℃±1℃培养。

4.培养结束后，放在记录卡上观察。

需滴加试剂明细表

HBI 肠杆菌科细菌生化鉴定条（GB）质量控制：

按使用说明进行操作，接种后置36±1℃培养。

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一、GB 4789.41 标准解读

适用范围	本标准适用于食品、环境样品及临床标本中肠杆菌科细菌的生化鉴定，包括常见菌属如大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌等的鉴别[2]。

核心检测方法

采用16种生化反应组合，包括：半固体琼脂动力试验、鸟氨酸/赖氨酸/精氨酸脱羧酶试验、西蒙氏枸橼酸盐利用试验、硫化氢产生试验、MR-VP反应、苯丙氨酸脱氨酶试验及多种糖醇类发酵试验（甘露醇、肌醇、山梨醇等）[2]。

检出限与定量限

本标准为定性检测方法，通过生化反应特征判断菌种类型，不涉及定量分析。

质控样品要求

需使用标准菌株（如大肠埃希氏菌ATCC 25922、鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028）进行阳性对照，并设置空白对照验证培养基有效性[4][7]。

关键实验步骤

1. 菌落纯化：从选择性培养基（如EMB平板）挑取单菌落
2. 氧化酶预筛：排除非肠杆菌科细菌
3. 菌悬液制备：生理盐水制成均一悬液
4. 生化反应接种：微量加样法或直接穿刺接种，需覆盖石蜡密封脱羧酶试验孔
5. 培养条件：36±1℃培养18-24小时[2][7]

特别说明	1. 含脱羧酶试验需严格厌氧环境 2. MR-VP试验需分步检测：甲基红试剂直接加入，VP试验需添加α-萘酚和氢氧化钾 3. 培养基保存：未开封鉴定条需避光2-8℃保存，开封后立即使用[2][4]

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