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HBI单增李斯特氏菌生化鉴定条(GB)/用于单增李斯特氏菌的生化鉴定（GB4789.30标准）

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5条/盒

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见证书

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HBI单增李斯特氏菌生化鉴定条(GB)介绍：

用于单增李斯特氏菌的生化鉴定组成：木糖发酵管、鼠李糖发酵管、SIM生化管、3%过氧化氢酶试剂、葡萄糖、麦芽糖发酵管、甘露醇发酵管、七叶苷发酵管、MR-VP(2孔)，共10种生化反应。（GB标准）

添加剂：每盒鉴定条需配套1盒 HB8281 V-P试剂盒和1盒 HB8280 甲基红指示剂使用。

使用方法：

1.实验准备：

从包装盒中取出一条生化鉴定条，打开盖子，用打孔器开孔或直接把膜撕掉。如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一条。注：打孔器用75%酒精擦拭后使用。

2.接种方法：

从选择性平板上分别挑取5个以上的典型或可疑菌落，在TSA-YE平板上划线纯化，于30±1℃培养24-48h。进行过氧化氢酶、动力实验、糖发酵（木糖、鼠李糖、葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、七叶苷）和MR-VP试验(注：由于单增李斯特氏菌菌落通常较小，接种时可多挑一些菌，并延长培养时间)。请参照GB4789.30标准判断结果。

菌悬液法：

取一内盛2ml无菌生理盐水试管，用接种针从纯化培养的平板上挑取1-2个菌落至无菌生理盐水中仔细研磨制成均一细菌悬液，每孔加入100ul菌悬液。其中SIM生化管(安瓿瓶)采用穿剌接种。

3.接种完后做好标记，盖上盖子，放入底托中，放置36℃±1℃培养。

4.培养结束后，放在记录卡上观察。

需滴加试剂明细表

HBI 单增李斯特氏菌成套生化鉴定条质量控制：

按使用说明进行操作，接种后置36±1℃培养。

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标准解读

适用范围	适用于食品中单核细胞增生李斯特氏菌的定性检验（第一法）、高含量样本的定量检测（第二法）及低含量样本的MPN计数（第三法）[5]。

核心检测方法

采用李氏增菌肉汤（LB1/LB2）分阶段增菌，结合显色培养基（PALCAM/CHROMagar）分离，通过溶血试验、动力观察及生化反应（如七叶苷水解、糖发酵试验）进行最终鉴定[4][5]。

检出限与定量限

第一法为定性检测；第二法适用于≥10 CFU/g的样本；第三法MPN法检测限为0.04 MPN/g，定量范围0.04-110 MPN/g[5]。

质控样品要求

需同步进行阳性对照（单增李斯特氏菌标准菌株）和阴性对照（无菌生理盐水），显色培养基需验证特异性，增菌液需监控选择性抑制效果[4][5]。

关键实验步骤

1. 前增菌：30℃培养24h后转接LB2继续培养
2. 分离培养：使用PALCAM和显色培养基35℃培养48h
3. 形态学筛选：挑取灰绿色带黑色中心的菌落
4. 生化验证：包括过氧化氢酶试验、溶血特性及糖类发酵试验[4][5]

特别说明	1. 需与伊氏李斯特氏菌进行鉴别（CAMP试验阳性） 2. 冷冻样品需在45℃以下解冻≤15min 3. 即食食品需采用n=5的抽样方案执行"零容忍"限量标准[4][5]

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