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HBI大肠杆菌生化鉴定条/用于大肠杆菌的生化鉴定（GB4789.38标准）

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5条/盒

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见证书

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HBI大肠杆菌生化鉴定条介绍：

用于大肠杆菌的生化鉴定，每条组成：靛基质试验、西蒙氏枸椽酸盐、MR试验、VP试验。（需Kovacs锭基质试剂、甲基红试剂、VP试剂）(GB4789.38标准）

添加剂：每盒鉴定条需配套

1盒 HB8281 V-P试剂盒

1盒 HB8280 甲基红指示剂

1盒 HB8279 kovacs靛基质试剂盒

使用说明：

1.实验准备：

从包装盒中取出一条生化鉴定条，打开盖子，用打孔器开孔或直接把膜撕掉。如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一条。注：打孔器用75%酒精擦拭后使用。

2.接种方法：

取初步生化试验后的可疑菌落，划线接种到营养琼脂平板进行纯化培养(36±1℃培养18-24h)，取纯化菌落做靛基质、甲基红、VP试验和柠檬酸盐试验。请参照GB4789.38标准判断结果。

菌悬液法：

取一内盛2ml无菌水或无菌生理盐水试管，用接种针从营养琼脂平板上挑取1-2个菌落至无菌生理盐水中仔细研磨制成均一细菌悬液，每孔加入100ul菌悬液。

3.接种完后做好标记，盖上盖子，放入底托中，放置36℃±1℃培养。

4.培养结束后，放在记录卡上观察。

5.每条可做2个菌落。

需滴加试剂明细表

大肠埃希氏菌与非大肠埃希氏菌的生化鉴别

靛基质（I）

甲基红（MR）

VP试验（VP）

柠檬酸（C）

鉴别

典型大肠埃希氏菌

非典型大肠埃希氏菌

典型中间型

非典型中间型

典型产气肠杆菌

非典型产气肠杆菌

注：如出现上表以外的生化反应类型，表明培养物可能不纯，需重新划线分离，必要时做重复试验。

大肠杆菌生化鉴定条质量控制：

按使用说明进行操作，接种后置36±1℃培养。

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食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数

适用范围：食品中大肠埃希氏菌的分离、鉴定与计数，适用于食品生产、流通及监管环节的微生物检测[4][5]。

核心检测方法

基于IMViC生化试验（靛基质、甲基红、V-P、柠檬酸盐试验）鉴定大肠埃希氏菌，结合菌落计数法进行定量分析[4][5]。

检出限与定量限

最低检出限为1 CFU/g，定量范围需结合样品稀释梯度，平板上典型菌落数应在30-300 CFU之间[4][5]。

质控样品要求

需同步进行阳性对照（如ATCC 25922标准菌株）和阴性对照试验，培养基需空白培养验证无菌性[4][5]。

关键实验步骤

1. 菌悬液制备：挑取纯化菌落制成均一悬液（浓度约10⁸ CFU/ml）
2. 生化反应：按顺序进行靛基质（加Kovacs试剂）、甲基红（培养后加试剂）、V-P（加A/B液）和柠檬酸盐试验
3. 结果判定：依据显色反应判断生化特性，综合IMViC模式确认菌种[4][5]

特别说明

1. 靛基质试验需在培养18-24小时后立即观察，延迟可能导致假阴性
2. V-P试验需充分混匀试剂并观察4小时内的显色变化
3. 柠檬酸盐利用试验需排除非特异性颜色干扰[4][5]

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