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HBI蜡样芽胞杆菌生化鉴定条(新标准)/用于蜡样芽胞杆菌的生化鉴定(GB4789.14标准)_
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HBI蜡样芽胞杆菌生化鉴定条(新标准)/用于蜡样芽胞杆菌的生化鉴定(GB4789.14标准)

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HBI蜡样芽胞杆菌生化鉴定条(新标准)介绍:

    用于蜡样芽胞杆菌生化试验,每条包括:西蒙氏枸橼酸盐 、动力培养基、硝酸盐肉汤、VP试验 、明胶培养基 、溶菌酶肉汤、淀粉水解、甘露醇 、葡萄糖 、3%过氧化氢酶试剂共10种生化反应。(GB标准)

注意事项:明胶的凝固点在28℃左右,受运输过程的温度及震荡影响,有可能出现培养基在管壁凝固形成不规则状,此为正常现象,并非质量问题,使用前可用水浴或培养箱或其他方法温育,使培养基呈液体流动状,摆直立即可。

添加剂:每盒鉴定条需配套

1盒 HB8281 V-P试剂盒

1盒 HB8282 硝酸盐还原试剂盒

1盒 GS070 无菌液体石蜡

1盒 HB9139 卢戈氏碘液

使用说明:

1.实验准备:

从包装盒中取出一条生化鉴定条,打开盖子,用打孔器开孔或直接把膜撕掉。如果染菌或变色,则不能使用,重新拿一条。注:打孔器用75%酒精擦拭后使用。

2.接种方法:

从选择性琼脂平板(MYP)上至少选取2个典型菌落或可疑菌落,接种于营养琼脂做成纯培养(36±1℃培养18-24h),取纯化菌落做过氧化氢酶、西蒙氏柠檬酸盐、动力-硝酸盐培养基、VP试验、木糖-明胶、甘露醇、葡萄糖试验。请参照GB/T4789.14标准判断结果。

菌悬液法:

取一内盛2ml无菌水或无菌生理盐水试管,用接种针从营养琼脂平板上挑取单个菌落至无菌生理盐水中仔细研磨制成0.5麦氏浊度的均一细菌悬液,每孔加入100ul菌悬液。其中动力-硝酸盐采用穿剌接种,葡萄糖需加灭菌石蜡覆盖液面。

3.接种完后做好标记,盖上盖子,放入底托中,放置36℃±1℃培养。

4.培养结束后,放在记录卡上观察。

需滴加试剂明细表

HBI 蜡样芽孢杆菌生化鉴定条(GB)质量控制:

按使用说明进行操作,接种后置36±1℃培养。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。

一、适用范围
GB 4789.14-2014标准适用于食品及其加工环境中蜡样芽胞杆菌的定性检测,涵盖生鲜食品、加工制品及环境样本的微生物学检验。该标准规定了从样品处理到结果判定的全流程要求[9]。
二、核心检测方法
标准采用选择性培养基分离结合生化鉴定法:
1. 样品经预处理后接种于MYP琼脂平板,30℃培养24-48小时;
2. 挑取典型菌落进行过氧化氢酶试验、溶血性观察及动力测定;
3. 采用生化鉴定条完成葡萄糖发酵、硝酸盐还原等7项关键生化反应[9]。
三、检出限与定量限
1. 定性检测灵敏度:≥1 CFU/25g样品;
2. 定量检测范围:10⁴-10⁶ CFU/g;
3. 最低定量限为10 CFU/g(需结合MPN法确认)[9]。
四、质控样品要求
1. 每批次检测需同步进行阳性对照(蜡样芽胞杆菌标准菌株ATCC 11778)和阴性对照(金黄色葡萄球菌ATCC 25923);
2. 质控菌株需每月进行复苏验证,保存期限不超过6个月;
3. 培养基需进行无菌试验和生长率验证[9][1]。
五、关键实验步骤
1. 样品均质:按1:10比例加入缓冲蛋白胨水,8000r/min均质2分钟;
2. 选择性增菌:30℃培养24小时后转接MYP平板;
3. 生化鉴定:纯化菌落接种鉴定条,30℃培养18-24小时观察结果[9][7]。
六、特别说明
1. 培养基需避光保存于2-8℃,开封后需标注启用日期;
2. 含有不稳定成分的鉴定条需即配即用,禁止反复冻融;
3. 实验人员需每半年进行标准菌株复苏能力验证[1][9]。

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