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支原体琼脂培养基（含精氨酸）/用于支原体的分离培养（含精氨酸、葡萄糖、酚红）

HB7025-1

Mycoplasma Agar Base

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250g

hopebio

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支原体琼脂培养基（含精氨酸）介绍：

用途:用于支原体的分离培养。

成分（g/L）

月示胨	1.0
蛋白胨	10.0
牛肉浸粉	1.0
牛心浸粉	4.0
氯化钠	5.0
葡萄糖	5.0
酵母浸粉	5.0
苯酚红	0.02
L-精氨酸	2.0
琼脂	12.0
pH值7.7±0.1	25℃

用法

称取本品 45g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,冷却至室温,无菌操作加入马血清 100ml、青霉素 80万单位和 1% 醋酸铊 10ml,混匀,分装无菌平皿。

支原体琼脂培养基(含精氨酸)微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养7-14天。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

本方法适用于主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞及临床治疗用细胞的支原体检查，要求同时采用培养法和指示细胞培养法（DNA染色法）。病毒类疫苗的病毒收获液、原液采用培养法检查支原体[7]。

二、核心检测方法

推荐使用支原体液体培养基（含精氨酸）、支原体琼脂培养基进行培养法检测。液体培养基需监测颜色变化（如酚红指示剂），琼脂培养基用于分离培养支原体菌落[7]。

三、检出限与定量限

培养基灵敏度需通过肺炎支原体（ATCC 15531）和口腔支原体（ATCC 23714）验证，要求10倍系列稀释后，变色单位试验显示2/3以上培养基管呈现变色的最高稀释度为检出限[7]。

四、质控样品要求

质控菌株需经国家药品检定机构分发，并在支原体培养基中传代培养至稳定状态。检测过程中需设置阴性对照（未接种培养基）和阳性对照（已知支原体菌株）[7]。

五、关键实验步骤

1. 样品处理：细胞培养物需过滤（0.22μm）去除细菌污染后接种。
2. 培养基配制：按处方称量后高压灭菌，冷却后无菌添加血清（如马血清）及抗生素（如青霉素）。
3. 培养条件：36℃±1℃培养7-14天，每日观察液体培养基颜色变化及琼脂平板菌落形态[7]。

六、特别说明

1. 含精氨酸的培养基适用于依赖精氨酸代谢的支原体（如口腔支原体）。
2. 培养基中酚红用于指示pH变化，不含酚红的琼脂培养基需通过菌落形态（典型“荷包蛋”状）判定结果。
3. 实验需在生物安全柜中进行，避免交叉污染[7]。

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