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PPLO琼脂/用于支原体分离和培养的基础培养基

HB8475-1

PPLO Agar

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250g

hopebio

见证书

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PPLO琼脂介绍：

用途：用于支原体分离和培养的基础培养基。

成分(g/700ml)

䏡胨	1.0
蛋白胨	10.0
牛肉浸粉	1.0
牛心浸粉	4.0
氯化钠	5.0
琼脂	14.0
pH值7.6-8.0	25℃

用法：

称取本品35.0g，加热溶解于700ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，冷至50-60℃时加入300ml支原添加剂（包括100ml除菌的新鲜酵母浸液和200ml马血清），混匀，备用。

新鲜酵母浸出液制备方法：

取500g鲜酵母或250g酵母干粉，加入至1500mL双蒸水中，搅拌均匀，充分溶解后煮沸15min，快速冷却，4000r/min离心15min，取上清液，再煮沸15min，冷却后用0.22μm微孔滤膜过滤除菌或116℃灭菌20min。

PPLO琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养7-14天。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

适用于支原体（Mycoplasma）的分离培养及检测，广泛用于临床、食品、环境样本中支原体污染的筛查与分析[5]。

二、核心检测方法

基于PPLO琼脂的微生物培养法，通过添加无菌马血清和酵母浸液提供营养，结合菌落形态观察及特异性生化反应进行鉴定[5]。

三、检出限与定量限

检出限为10 CFU/g（样本），定量限为50 CFU/g（样本），需通过梯度稀释法验证[5]。

四、质控样品要求

需同步接种已知支原体标准菌株（如Mycoplasma pneumoniae）作为阳性对照，并设置空白培养基对照，确保无交叉污染[5]。

五、关键实验步骤

1. 培养基配制：70ml PPLO琼脂基础+10ml酵母浸液+20ml马血清；
2. 样本处理：均质后梯度稀释；
3. 培养条件：37℃微需氧环境培养5-7天，观察典型“荷包蛋”状菌落[5]。

六、特别说明

1. 避免使用酚红指示剂，以防干扰菌落观察；
2. 部分非致病性支原体可能生长，需结合PCR或免疫学方法进一步确认[5]。

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