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动力-硝酸盐培养基（A法）/用于细菌的动力试验和硝酸盐还原试验

HB0278

Motility Nitrate Medium

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250g

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动力-硝酸盐培养基（A法）介绍：

用途：用于细菌的动力试验和硝酸盐还原试验。

成分(g/L)

蛋白胨	5.0
牛肉浸粉	3.0
硝酸钾	1.0
琼脂	4.0
pH值7.0±0.1	25℃

检验原理： 蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、矿物质；硝酸钾被某些细菌还原为亚硝酸盐；较少量的琼脂作为培养基的凝固剂。

用法：

称取本品13.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装试管，每管10ml，121℃高压灭菌15min，备用。

不同细菌在动力-硝酸盐培养基上的生长特征：

动力-硝酸盐培养基（A法）微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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标准名称及标准号

GB/T 4789.28-2013《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》

适用范围

该标准规定了食品微生物学检验中培养基和试剂的制备、质量控制及性能验证要求，适用于动力-硝酸盐培养基（A法）的配制与质控，用于细菌动力试验和硝酸盐还原试验的检测。

核心检测方法

动力试验：穿刺接种待测菌株于培养基中，35℃培养18-24小时，观察细菌沿穿刺线扩散生长情况。
硝酸盐还原试验：培养后加入硝酸盐还原试剂（如对氨基苯磺酸和α-萘胺），观察是否出现红色化合物（阳性反应）。

检出限与定量限

动力试验为定性检测，无定量限要求；硝酸盐还原试验的灵敏度为检出≥10^4 CFU/mL的细菌代谢产物。

质控样品要求

阳性对照：使用大肠埃希氏菌（动力阴性、硝酸盐还原阳性）和奇异变形杆菌（动力阳性、硝酸盐还原阳性）；
阴性对照：使用无菌培养基或非运动性菌株（如金黄色葡萄球菌）。

关键实验步骤

1. 培养基配制：按标准比例称量蛋白胨、硝酸钾等成分，调节pH至7.4±0.2，分装后121℃灭菌15分钟；
2. 接种方法：穿刺深度为培养基高度的2/3，避免触底；
3. 培养条件：需严格控温（35℃±1℃）和避光；
4. 试剂添加顺序：先加入对氨基苯磺酸，后加α-萘胺。

特别说明

1. 动力试验需在培养后立即观察，避免细菌过度生长干扰判断；
2. 硝酸盐还原试验若未显色，需补加锌粉排除假阴性；
3. 培养基中硝酸钾浓度不得低于0.1%，否则影响还原反应灵敏度。

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